阿魏酸钠预处理对大鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤线粒体的延迟保护作用

目的：研究阿魏酸钠（SF）预处理对心肌细胞缺氧／复氧（A／R）损伤的延迟保护作用的机制。方法：采用MTT比色法检测细胞存活率，生化检测细胞LDH活性、MDA含量、SOD活性和GPx活性．Western Blotting法检测SOD、GPx、HSP70的表达、TUNEL法与PI-Annexin V法测定细胞凋亡、流式细胞仪测定线粒体膜电位（△ψm）及ROS生成、分光光度法测定mPTP开放情况等指标，用终浓度为3．36mmol·L-1的SF预处理原代培养的大鼠乳鼠心肌细胞3h，24h后观察其对A／R损伤的保护作用及其ERKl／2抑制剂PDl84352（终浓度为0．5μmol·L-1）与基因转录抑制剂Act D（终浓度为5μmol·L-1）影响。结果：SF预处理能显著提高心肌细胞存活率、降低LDH活性、MDA含量减少；SOD、GPx活性增加，但其蛋白表达量却无明显差异；HSP70表达量显著上凋；ROS生成显著减少、mPTP开放与线粒体膜电位（△ψm）稳定、凋亡细胞比率减少。PDl84352、Act D均能取消SF预处理的上述作用。结论：SF预处理对心肌细胞A／R损伤延迟保护作用的机制可能与ERKl／2激活、上调HSP70蛋白表达、维护SOD、GPx等蛋白正常结构与功能，使得ROS生成减少、mPTP关闭、线粒体膜电位（△ψm）稳定、凋亡细胞减少有关。