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胃癌蛋白质组学研究中双向凝胶电泳技术的优化
引用本文:李炜,李建芳,蔡劬,瞿颖,孔雷,秦建民,刘炳亚. 胃癌蛋白质组学研究中双向凝胶电泳技术的优化[J]. 上海交通大学学报(医学版), 2008, 28(12)
作者姓名:李炜  李建芳  蔡劬  瞿颖  孔雷  秦建民  刘炳亚
作者单位:1. 上海中医药大学,普陀医院普外科,上海,200062
2. 上海交通大学,医学院瑞金医院外科,上海消化外科研究所,上海200025
摘    要:目的 优化应用于胃癌蛋白质组学研究的双向凝胶电泳技术.方法 利用双向凝胶电泳技术分离正常胃黏膜和胃癌组织中的蛋白质.比较不同蛋白提取方法(机械匀浆+TCA沉淀法.碾磨+丙酮/TCA沉淀法)、不同最高聚焦电压、不同样本上样量以及不同pH值范围固相pH梯度胶条对双向凝胶电泳结果的影响.结果 机械匀浆+TCA沉淀法得到的蛋白质点较多,但电泳图谱中出现大量横纹,对电泳图后期分析的干扰相对严重;碾磨+丙酮/TCA沉淀法则能达到最高聚焦电压,上样量少,使用pH 5-8固相pH梯度胶条获得可分辨的蛋白质点数最多且效果较好.结论 对胃癌组织、正常胃黏膜组织的全蛋白抽提方法和电泳条件进行了优化.

关 键 词:胃癌  双向电泳  蛋白质组学

Optimization of two dimensional gel electrophoresis technique for proteomics of gastric carcinoma
Abstract:
Keywords:
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