| 大鼠葡萄糖转运体3真核表达载体的构建及其在293细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 李方成,李军亮,刘然义,吴中华,张培峰.大鼠葡萄糖转运体3真核表达载体的构建及其在293细胞中的表达[J].中华实验外科杂志,2006,23(4):606-608. |
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| 作者姓名： | 李方成 李军亮 刘然义 吴中华 张培峰 |
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| 作者单位： | 1. 510120,广州,中山大学附属第二医院神经外科
2. 中山大学肿瘤防治中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（39900048）;广东省自然科学基金资助项目（010721） |
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| 摘 要： | 目的构建大鼠葡萄糖转运体3（GLUT3）的真核表达载体，为进一步研究葡萄糖转运体3对缺血缺氧脑细胞的保护作用奠定基础。方法以逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）的方法从大鼠脑组织中获取GLUT3全长cDNA片段，将其克隆至真核表达质粒pcDNA3．1（＋）中，构建重组真核表达质粒pcDNA3．1（＋）-Glut3，随后用Lipofectamine^TM2000介导转染HEK293细胞，以RT-PCR的方法检测重组质粒在mRNA水平的表达，以免疫组织化学的方法检测重组质粒在蛋白水平的表达。结果克隆的大鼠GLUT3全长cDNA大小约1．5kb且无碱基突变，以构建的重组真核表达质粒pcDNA3．1（＋）-Glut3转染293细胞后，在基因及蛋白表达水平均检测到了葡萄糖转运体3的表达。结论成功构建了携带大鼠葡萄糖转运体3的真核表达载体pcDNA3．1（＋）-Glut3，且证实其可在293细胞中成功表达目的基因。
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| 关 键 词： | 葡萄糖转运体 真核表达 脑缺血 |
| 收稿时间： | 2005-08-31 |
| 修稿时间： | 2005年8月31日 |
Construction of the eukaryotic expression vector carrying rat GLUT3 gene and its expression in 293 cells |
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| LI Fan-cheng , LI Jun-liang, LIU Ran-yi,et al..Construction of the eukaryotic expression vector carrying rat GLUT3 gene and its expression in 293 cells[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2006,23(4):606-608. |
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| Authors: | LI Fan-cheng LI Jun-liang LIU Ran-yi |
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| Institution: | Department of Neurosurgery, Second Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510120, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | GLUT Eukaryotic expression Cerebral ischemia |
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