| 非融合表达β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌的构建和性能研究 |
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| 作者姓名： | 汪川 刘衡川 裴晓方 余倩 张朝武 |
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| 作者单位： | 四川大学华西公共卫生学院,医学检验教研室,成都610041;四川大学华西公共卫生学院,医学检验教研室,成都610041;四川大学华西公共卫生学院,医学检验教研室,成都610041;四川大学华西公共卫生学院,医学检验教研室,成都610041;四川大学华西公共卫生学院,医学检验教研室,成都610041 |
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| 基金项目： | 四川省卫生厅科学研究基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建能非融合表达高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,并对其酶活性和分泌性能进行研究.方法 提取能在大肠杆菌中非融合表达德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶的重组质粒pMG36e-lacZ 1.1480和pMG36e-lacZ wch9901,电转化乳酸乳球菌乳酸亚种MGl363.测定重组菌在不同培养时间和乳糖浓度下的β-半乳糖苷酶活性,及在不同培养条件下的酶分泌率.结果 携带pMG36e-lacZ wch9901的重组乳酸乳球菌(MG1363/pMG36e-lacZ wch9901)具最高酶活性,其β-半乳糖苷酶活性达(16.95±0.09)U/mg pro,为基因初始菌的2.75倍;重组乳酸乳球菌培养24 h产酶达高峰;培养基含乳糖时,重组菌酶活测定结果表现为降低;重组乳酸乳球菌表达的β-半乳糖苷酶可分泌到培养基中,当培养基不含红霉素,而含20 g/L乳糖时,分泌率最高,达(27.09±0.05)%.结论 获得了能非融合表达和分泌高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,可在此基础上进一步研制β-半乳糖苷酶活菌释放体.
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| 关 键 词： | β-半乳糖苷酶 乳酸乳球菌 乳糖不耐受 蛋白表达 蛋白分泌 |
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