回回甘松饮含药血清对大鼠肾小球系膜细胞增殖、周期及FN, Col1α1, Col4α1基因表达的影响

目的：探讨回回甘松饮（HGY）含药血清对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞（MCs）增殖、细胞周期、纤维连接蛋白（FN）、Ⅰ型胶原α1多肽链（Col1α1）、Ⅳ型胶原α1多肽链（Col4α1）基因表达的影响。方法：采用中药血清药理学方法制备含药血清，将大鼠随机分为空白对照组（给予蒸馏水10 mL·kg^-1）、格列喹酮（10 mg·kg^-1）组、HGY（10，5 g·kg^-1）组，每组各10只，每日灌胃给药2次，连续3 d后取大鼠血清。选取HBZY-1细胞株进行实验，共分为5组：10%空白血清组、高糖+10%空白血清组、高糖+10%格列喹酮含药血清组（10 mg·kg^-1）、高糖+10%HGY含药血清组（10，5 g·kg^-1）。细胞以2×10⁴/mL接种于96孔细胞培养板上，分别于药物处理后24，48，72 h时，采用CCK-8法检测MCs增殖情况；细胞以2×10⁴/mL接种于25 cm²细胞培养瓶中，于药物干预48 h时收集细胞，分别采用流式细胞术检测细胞周期变化，real-time PCR方法检测FN、Col1α1及Col4α1 mRNA的表达。结果：与10%空白血清组比较，高糖（30 mmol·L^-1）能够诱导MCs增殖（P<0.01），并能使G₀/G₁期细胞比例减少（P<0.01），S期比例增加（P<0.01），能够使MCs中FN，Col1α1，Col4α1 mRNA表达量明显升高（P<0.01）。在上述含药血清干预的48，72 h时，各含药血清组MCs均受到一定程度抑制，发生G₁/S期阻滞，并可降低高糖条件下MCs中FN，Col1α1，Col4α1 mRNA表达量，与高糖+10%空白血清组比较，具有显著性差异（P<0.01或P<0.05）。结论：HGY含药血清可使大鼠MCs在高糖环境下发生G₁/S期阻滞，抑制其增殖，其机制可能与调控FN，Col1α1及Col4α1 mRNA表达有关。