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膜联蛋白A5绿色荧光蛋白重组质粒的构建及其在宫颈癌细胞系Hela细胞中的表达
引用本文:李欣,高福禄,王芳,何颖,孙树汉. 膜联蛋白A5绿色荧光蛋白重组质粒的构建及其在宫颈癌细胞系Hela细胞中的表达[J]. 解剖学杂志, 2006, 29(4): 443-445
作者姓名:李欣  高福禄  王芳  何颖  孙树汉
作者单位:河北医科大学,石家庄,050017;承德医学院组织学与胚胎学教研室,承德,067000;第二军医大学遗传学教研室,上海,200433
摘    要:目的:构建在哺乳动物细胞中表达的膜联蛋白A5(anxA5)的重组质粒,并在真核细胞中表达。方法:用PCR方法从pJLA503-anxA5质粒中扩增anx A5的基因序列,引入酶切位点XhoⅠ和Bam HⅠ。将真核表达质粒pEGFP-N1和anxA5的PCR产物经双酶切后用T4连接酶连接,并经鉴定序列正确后,用磷酸钙共沉淀法稳定转染Hela细胞,荧光显微镜下观察;免疫细胞化学染色观察anxA5在Hela细胞的表达。结果:重组质粒鉴定正确,稳定转染Hela细胞,在荧光显微镜下可见绿色荧光,免疫细胞化学染色可见anxA5表达。结论:成功构建了pEGFP-anxA5重组质粒,并能在宫颈癌细胞系Hela细胞中表达,为研究anxA5的功能及其在细胞系中的作用奠定了基础。

关 键 词:膜联蛋白A5  绿色荧光蛋白  重组质粒  Hela细胞
收稿时间:2006-02-17
修稿时间:2006-02-172006-04-25

Construction of recombinant plasmid pEGFP-anxA5 and its expression in Hela cells
LI Xin,GAO Fu-Lu,WANG Fang,HE Ying,SUN Shu-Han. Construction of recombinant plasmid pEGFP-anxA5 and its expression in Hela cells[J]. Chinese Journal of Anatomy, 2006, 29(4): 443-445
Authors:LI Xin  GAO Fu-Lu  WANG Fang  HE Ying  SUN Shu-Han
Affiliation:1. Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, China; 2. Department of Histology and Embrgology, Chengde Medical College, Chengde 067000, China; 3. Department of Medical Genetics, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China
Abstract:
Keywords:annexin A5  green fluorescent protein  recombinant plasmid  Hela cells
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