| 筛选CD4结合蛋白的酵母双杂交饵载体构建及功能鉴定 |
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| 引用本文： | 窦洁,姚堃,徐建,陈云,周峰,彭光勇.筛选CD4结合蛋白的酵母双杂交饵载体构建及功能鉴定[J].中华微生物学和免疫学杂志,2006,26(4):289-292. |
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| 作者姓名： | 窦洁 姚堃 徐建 陈云 周峰 彭光勇 |
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| 作者单位： | 210029,南京医科大学微生物学与免疫学系 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(No.30371345);江苏省自然科学基金资助项目(BK97051,BK2001115) |
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| 摘 要： | 目的构建用于筛选人CD4结合蛋白的酵母双杂交饵载体,并对其功能进行鉴定.方法RT-PCR扩增编码CD4的cDNA.构建双杂交饵载体pAS2-1-CD4,并转化入宿主酵母菌Y190中.通过测定报告基因——β-半乳糖苷酶的活性,判断饵载体自激活报告基因能力.将CD4的已知HIV配体gp120构建入猎物载体pACT2,转入重组菌Y190/pAS2-1-CD4.检测其报告基因活性,鉴定pAS2-1-CD4是否具有筛选CD4结合蛋白的能力.结果DNA序列测定证实,获得了编码CD4蛋白的cDNA序列.β-半乳糖苷酶活性测定表明,pAS2-1-CD4单独无自激活能力,与猎物载体pACT2-gp120能够发生相互作用,激活报告基因表达.结论构建了酵母双杂交饵载体pAS2-1-CD4,为筛选CD4结合蛋白（尤其是筛选病毒编码的CD4配体）,提供了技术平台.
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| 关 键 词： | CD4 酵母双杂交 饵载体 自激活 gp120 |
| 修稿时间： | 2005年6月6日 |
Construction and identification of a yeast two-hybrid bait vector for screening of Homo sapiens CD4-binding proteins |
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| DOU Jie,YAO Kun,XU Jian,CHEN Yun,ZHOU Feng,PENG Guang-yong.Construction and identification of a yeast two-hybrid bait vector for screening of Homo sapiens CD4-binding proteins[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2006,26(4):289-292. |
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| Authors: | DOU Jie YAO Kun XU Jian CHEN Yun ZHOU Feng PENG Guang-yong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CD4 Yeast two-hybrid Bait vector Self-activation gp120 |
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