人三磷酸鸟苷酸环化水解酶I基因的克隆与表达

目的 研究人三磷酸鸟苷酸环化水解酶I(GCH I)基因在多巴胺代谢过程中的作用。方法 从人胚胎肝脏中提取总RNA，以RT-PCR法扩增GCH I cDNA，克隆于PGEM—T-easy载体中，测序正确后再构建真核表达载体，转染猴肾成纤维细胞系COS7，原位杂交检测其表达。结果RT-PCR扩增出904bp的cDNA，并成功构建真核表达载体pCI—neo—GCHI，原位杂交证实其在COS7表达阳性率为70％-80％。结论 GCHI有望用于帕金森病的基因治疗。