抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ单克隆抗体的制备与鉴定

目的制备并鉴定鼠源抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ单克隆抗体（Monoclonal Antibody,McAb）。方法重组Der fⅡ蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠免疫脾细胞与NS-1细胞融合。间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞。用筛选获得的单克隆细胞株诱生小鼠腹水,蛋白G亲和层析法纯化腹水抗体。利用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting方法鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性。结果获得5株IgG2a型鼠抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ的单克隆抗体,效价良好。ELISA和Western Blotting分析表明该5株单抗均可识别重组Der fⅡ蛋白和天然粉尘螨提取物。结论成功制备了5株鼠抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ的单克隆抗体,为建立粉尘螨主要变应原Der fⅡ的检测及纯化方法奠定了基础。