Ca2＋对小鼠骨髓基质干细胞定向分化为肝细胞的作用

目的研究小鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）向肝细胞定向分化过程中Ca2＋的变化,探讨BMSCs向肝细胞定向分化的机制。方法无菌分离小鼠骨髓,贴壁法纯化和扩增BMSCs。分别添加肝组织提取液、β-神经生长因子（β-NGF）、β-NGF＋尼莫地平诱导BMSCs向肝细胞分化,对照组添加等量营养液。光镜下观察分化细胞的形态;免疫细胞化学染色法检测分化细胞的肝细胞特异性标志物α-1-抗胰蛋白酶（AAT）和清蛋白（ALB）的表达;吲哚靛青绿（ICG）摄取实验鉴定分化细胞的转运功能;流式细胞技术对比检测肝样分化细胞内游离Ca2＋的含量;MTT法检测钙离子拮抗剂尼莫地平对干细胞增殖和定向分化能力的影响。结果肝组织提取液和β-NGF诱导后,分化细胞逐渐变圆、呈肝前体细胞特定形态;分化细胞摄取ICG,呈绿色;分化细胞呈AAT和ALB阳性表达;肝组织提取液组和β-NGF组比较差异无显著意义。β-NGF诱导形成的肝样分化细胞Ca2＋含量显著高于对照组细胞（t=8.757,P〈0.01）。尼莫地平可以阻断BMSCs向肝细胞的诱导分化,抑制干细胞的增殖。结论 Ca2＋对BMSCs的增殖和向肝细胞定向分化具有重要的作用。