二氧化硅诱导大鼠肺成纤维细胞转分化中基因组甲基化水平

目的 探讨二氧化硅(SiO2)诱导大鼠肺成纤维细胞转分化过程中基因组的甲基化水平.方法 采用直接和间接细胞共培养方法对SD大鼠巨噬细胞、肺成纤维细胞进行原代培养,以25、50、100 μg/ml的SiO2作为受试物,采用免疫细胞化学方法对肺成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞进行鉴定,采用高效液相色谱法检测成纤维细胞的基因组甲基化水平.结果 间接共培养方式下,与空白组比较,25、50、100 μg/ml SiO2剂量组成纤维细胞的基因组甲基化水平分别降低19.9％、26.9％、30.3％,差异有统计学意义(P＜0.05);与100 μg/ml SiO2剂量组比较,对照组5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-dC)处理后成纤维细胞基因组甲基化水平降低22.0％,差异有统计学意义(P＜0.05).ThinCertTM共培养方式下,与空白组比较,25、50、100μg/ml SiO2剂量组成纤维细胞的基因组甲基化水平分别降低22.2％、30.2％、36.7％,差异有统计学意义(P＜0.05);与100μg/ml SiO2剂量组比较,对照组5-aza-dC处理后成纤维细胞基因组甲基化水平降低20.6％,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 矽肺体外细胞模型共培养方式下,SiO2可引起成纤维细胞基冈组甲基化水平降低,用ThinCertTM共培养方式建立的体外细胞模型在矽肺纤维化发生研究中有应用前景.

DNA methylation levels of genome in cFb transdifferentiation induced by SiO2 in rats