| 脾内微量注射免疫法制备抗重组可溶性组织因子单克隆抗体 |
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| 引用本文： | 蔡旭,彭卓醇,孔德升,郭泓珅,白浩,宋后燕,马端. 脾内微量注射免疫法制备抗重组可溶性组织因子单克隆抗体[J]. 复旦学报(医学版), 2006, 33(1): 92-96 |
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| 作者姓名： | 蔡旭 彭卓醇 孔德升 郭泓珅 白浩 宋后燕 马端 |
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| 作者单位： | 复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系-分子医学教育部重点实验室,上海,200032;复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系-分子医学教育部重点实验室,上海,200032;复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系-分子医学教育部重点实验室,上海,200032;复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系-分子医学教育部重点实验室,上海,200032;复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系-分子医学教育部重点实验室,上海,200032;复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系-分子医学教育部重点实验室,上海,200032;复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系-分子医学教育部重点实验室,上海,200032 |
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| 基金项目： | 重庆市应用基础研究基金;上海市科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的制备抗重组可溶性组织因子(r-sTF)单克隆抗体并建立检测组织因子(TF)含量的夹心ELISA法,以期为TF的深入研究及临床应用提供参考依据。方法取微量TF对Balb/c小鼠直接进行脾内注射免疫,分离小鼠脾细胞和鼠骨髓瘤细胞,融合后对杂交瘤细胞进行筛选克隆化培养;建立了3株稳定分泌TF单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1-C3、2-G9、3-H9;进而在小鼠体内诱生腹水,并用rprotein A亲合层析法纯化;经鉴定后用过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记于其中一株单抗上,建立夹心ELISA法测定正常人血浆中的TF含量。结果纯化的单抗用SDS-PAGE测定纯度,在Mr为150 000左右呈现一条带;Western blot测定显示1-C3、2-G9、3-H9分泌的单抗可特异地识别Mr为47 000的TF,经免疫球蛋白(Ig)类和亚类鉴定实验证实3株单抗均为IgG1;用夹心ELISA法检测正常人血浆中的TF含量为(130±80)pg/mL。结论用脾内微量注射法成功制备抗TF单克隆抗体及ELISA测定TF含量方法的建立,为TF的制备纯化和检测奠定了基础,也使TF的临床深入化研究成为可能。
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| 关 键 词： | 重组可溶性组织因子 免疫 单克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2005-05-12 |
| 修稿时间： | 2005-05-12 |
Preparation of anti-recombinant soluble tissue factor monoclonal antibody by trace injecting antigen into spleen |
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| CAI Xu,PENG Zuo-chun,KONG De-sheng,GUO Hong-shen,BAI Hao,SONG Hou-yan,MA Duan. Preparation of anti-recombinant soluble tissue factor monoclonal antibody by trace injecting antigen into spleen[J]. Fudan University Journal of Medical Sciences, 2006, 33(1): 92-96 |
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| Authors: | CAI Xu PENG Zuo-chun KONG De-sheng GUO Hong-shen BAI Hao SONG Hou-yan MA Duan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | recombinant soluble tissue factor immunity monoclonal antibody |
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