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| 膦丝菌素乙酰转移酶的表达及单克隆抗体制备 | |
| 引用本文： | 高旭东,王永志,时圣凤,李忠鹏,李小宇,徐文静,张正坤,路扬,张佳诗.膦丝菌素乙酰转移酶的表达及单克隆抗体制备[J].细胞与分子免疫学杂志,2013,29(5):500-503. |
| 作者姓名： | 高旭东 王永志 时圣凤 李忠鹏 李小宇 徐文静 张正坤 路扬 张佳诗 |
| 作者单位： | 1. 东北农业大学园艺学院,黑龙江哈尔滨150030;吉林省农业科学院,农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室,吉林长春130033 2. 吉林省农业科学院,农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室,吉林长春130033 3. 吉林农业大学生命科学院,吉林长春,130118 |
| 基金项目： | 农业部转基因专项"抗病虫转基因大豆新品种培育"，中青年科技领军人才及优秀创新团队项目"吉林省农业微生物研究与利用研究创新团队"，吉林省农业微生物重点实验室平台建设项目 |
| 摘 要： | 目的 表达有生物活性的膦丝菌素乙酰转移酶(PAT),制备PAT蛋白单克隆抗体(mAb).方法 通过PCR克隆bar基因编码区全长,将bar基因与原核表达载体pET28a(+)连接,构建重组质粒pET28-bar并转化大肠杆菌菌株BL21 (DE3),经IPTG诱导目的蛋白表达,利用镍离子亲和层析纯化PAT蛋白,分析PAT蛋白活性.免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾脏与Sp2/0细胞融合,经间接ELISA筛选分泌抗PAT蛋白抗体杂交瘤细胞.结果 在大肠杆菌中以可溶形式表达出重组PAT蛋白,纯化的重组PAT蛋白具有乙酰转移酶活性,制备了9株抗PAT蛋白mAb.结论 表达的PAT蛋白可以用于除草剂解除剂研究,制备的mAb可能用于转基因产品的检测研究. |
| 关 键 词： | 膦丝菌素乙酰转移酶 bar基因 蛋白表达 活性 抗体制备 |
Preparation of monoclonal antibody against phosphinothricin acetyltransferase |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |
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