| HBV融合抗原真核表达载体pIRES-neo-HBAg的构建及表达 |
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| 引用本文： | 王琳,王宇,吴昊,朱晓明,于继云,蒋建利,阎瑾琦.HBV融合抗原真核表达载体pIRES-neo-HBAg的构建及表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2013,29(5):469-472. |
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| 作者姓名： | 王琳 王宇 吴昊 朱晓明 于继云 蒋建利 阎瑾琦 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学细胞工程研究中心,陕西西安,710032
2. 军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850 |
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| 摘 要： | 目的 构建HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,并验证其在293T细胞中的表达.方法 以含有HBV融合抗原的质粒pVAX1-HBV为模板,PCR扩增该融合基因.PCR产物经纯化后,将其克隆至载体pMD18-T中,构建pMD18-T-HBV质粒,经酶切和测序鉴定后,将其定向克隆入真核表达载体pIRES-neo,获得真核表达质粒pIRES-neo-HBAg.将该重组表达质粒瞬时转染人293T细胞,采用Western blot法、流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术验证HBV融合抗原的表达.结果 成功构建了HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,Western blot法、流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术结果显示融合抗原能够在293T细胞中表达.结论 成功构建了HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg.
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| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 HBV融合抗原 真核表达 pIRES-neo 293T细胞 |
Construction and expression of eukaryotic expression plasmid pIRES-neo-HBAg carrying HBV fusion antigen gene |
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