| 重组人α-突触核蛋白原核表达系统的建立及纯化方法 |
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| 引用本文： | 杨智源,吕春香,王鹏.重组人α-突触核蛋白原核表达系统的建立及纯化方法[J].中国老年学杂志,2011,31(9). |
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| 作者姓名： | 杨智源 吕春香 王鹏 |
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| 作者单位： | 1. 长春医学高等专科学校内科教研室,吉林长春,130031
2. 吉林大学第二院妇产科
3. 北华大学基础医学院 |
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| 摘 要： | 目的 构建α-突触核蛋白的原核表达系统,通过蛋白纯化的定量测定,确定表达这一蛋白的最合适载体和纯化方法,为进一步研究岶金森病病理机制奠定基础.方法 将含有α-突触核蛋白DNA序列的质粒pET3a-Syn和pCEX-4T-1-Syn分别转入BL21(DE3),IPTG(异丙基-D-硫代半乳糖苷)诱导表达,分别采用HPLC和亲和层析的方法进行纯化.纯化后的蛋白进行SDS-PAGE电泳检测纯度,BCA法进行定量比较.结果 构建了α-突触核蛋白两种载体的原核表达系统.pET3a-Syn表达的蛋白,每升菌液可获得20.5 mg目的蛋白;pGEX-Syn表达的蛋白,每升菌液可获得4.8 mg目的蛋白.结论 比较了两种α-突触核蛋白载体表达情况,确定了能够得到大量、高纯度α-突触核蛋白的纯化方法.
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| 关 键 词： | α-突触核蛋白 帕金森病 |
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