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沉默Calnexin基因表达对胃癌细胞SGC-7901内质网应激凋亡及其信号通路的影响
引用本文:张晓海,张洪涛,胡孝定,钟华.沉默Calnexin基因表达对胃癌细胞SGC-7901内质网应激凋亡及其信号通路的影响[J].浙江医学,2017,39(4):259-262,276.
作者姓名:张晓海  张洪涛  胡孝定  钟华
作者单位:德清,浙江省皮肤病防治研究所内科
基金项目:浙江省医药卫生科研项目(2013KYB076)
摘    要:目的探讨沉默钙连蛋白(Calnexin)基因对胃癌细胞SGC-7901内质网应激凋亡信号通路的影响。方法构建靶向Calnexin基因的慢病毒干扰载体,利用包装细胞293T获得重组慢病毒,转染人胃癌SGC-7901细胞,并分为转染shRNA-Calnexin的实验组,转染shRNA空白质粒的空白载体组,并将未转染的SGC-7901细胞作为对照组。应用RT-PCR技术检测靶向沉默Calnexin的表达,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测各组细胞增殖情况;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;Westernblot检测GRP94、IRE1、ATF6及CHOP表达水平。结果转染shRNA沉默Calnexin基因可明显下调CalnexinmRNA的表达,实验组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);MTT法检测实验组细胞转染后细胞增殖能力明显下降(P<0.05);沉默Calnexin基因可提高细胞凋亡率,转染72h后实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);沉默Calnexin基因使胃癌细胞中GRP94、IRE1、ATF6及CHOP蛋白表达水平明显升高(均P<0.05)。结论靶向沉默Calnexin基因抑制人胃癌细胞增殖和促进细胞凋亡可能是通过抑制内质网应激信号通路实现的。

关 键 词:钙连蛋白  SGC-7901  细胞  慢病毒  内质网应激  凋亡  胃癌

Effects of calnexin silencing on endoplasmic reticulum stress-apoptosis and its signaling pathway in gastric cancer cell line SGC-7901
ZHANG Xiaohai,ZHANG Hongtao,HU Xiaoding and ZHONG Hua.Effects of calnexin silencing on endoplasmic reticulum stress-apoptosis and its signaling pathway in gastric cancer cell line SGC-7901[J].Zhejiang Medical Journal,2017,39(4):259-262,276.
Authors:ZHANG Xiaohai  ZHANG Hongtao  HU Xiaoding and ZHONG Hua
Institution:Zhejiang Skin Disease Prevention and Treatment Center
Abstract:
Keywords:Calnexin    SGC-7901 cell    Slow virus    Endoplasmic reticulum stress    Apoptosis    Gastric cancer
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