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长期索拉菲尼暴露促进Huh7肝癌细胞上皮间质变的实验研究
引用本文:刘俊,王清清,曹浩强,张浩.长期索拉菲尼暴露促进Huh7肝癌细胞上皮间质变的实验研究[J].浙江医学,2017,39(4):250-254.
作者姓名:刘俊  王清清  曹浩强  张浩
作者单位:安徽,蚌埠医学院
基金项目:浙江省“十二五”基层卫生适宜技术成果转化工程重大项目(2013T301-12、15);嘉兴市科技计划项目(2013AY21042-5);嘉兴市重点科技创新团队项目([2013]3号)
摘    要:目的探讨索拉菲尼耐药肝癌细胞发生上皮间质变(EMT)及侵袭、转移能力增强的机制。方法通过药物连续诱导人肝癌细胞株Huh7建立索拉菲尼耐药肝癌细胞株Huh7R,显微镜下观察细胞形态学变化;CCK-8细胞增殖试验检测Huh7R细胞增殖能力;荧光定量PCR检测ABC家族耐药基因ABCB1、ABCC1、ABCG2及EMT相关调控锌指蛋白转录因子Snail、Slug基因表达水平;Westernblot检测耐药蛋白ABCG2,EMT标记分子E-cadherin、Vimentin及N-cadherin,转录因子Snail、Slug蛋白表达水平;Transwell小室侵袭试验检测Huh7R细胞迁移、侵袭能力。结果Huh7R细胞呈细长形,伴纤维状突起,形态学上符合EMT改变;CCK-8细胞增殖试验显示在索拉菲尼作用下,Huh7R细胞生存率高于Huh7细胞;荧光定量PCR结果显示,Huh7R细胞ABCB1、ABCC1、ABCG2及Snail、Slug基因表达水平均高于Huh7细胞(均P<0.05);Westernblot显示,Huh7R细胞上皮标记蛋白E-cadherin表达水平低于Huh7细胞(P<0.05),而间质标记蛋白Vimenti、N-cadherin及Snail、Slug蛋白表达水平均高于Huh7细胞(均P<0.05);Transwell小室侵袭试验显示Huh7R细胞迁移、侵袭能力均较Huh7细胞增强。结论长期低剂量索拉菲尼暴露会促进肝癌细胞Snail和Slug表达,诱导肿瘤细胞发生EMT,增强其侵袭、转移能力。

关 键 词:肝癌  索拉菲尼  转录因子  上皮间质变  耐药

Epithelial-mesenchymal transition and migrant/invasion ability in human sorafenib-resistant hepatocellular carcinoma Huh7 cells
LIU Jun,WANG Qingqing,CAO Haoqiang and ZHANG Hao.Epithelial-mesenchymal transition and migrant/invasion ability in human sorafenib-resistant hepatocellular carcinoma Huh7 cells[J].Zhejiang Medical Journal,2017,39(4):250-254.
Authors:LIU Jun  WANG Qingqing  CAO Haoqiang and ZHANG Hao
Institution:Bengbu Medical College
Abstract:
Keywords:
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