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RNA干扰阻抑Bax inhibitor-1(bi-1)基因表达对卵巢癌细胞凋亡的影响
引用本文:张美红,周克元.RNA干扰阻抑Bax inhibitor-1(bi-1)基因表达对卵巢癌细胞凋亡的影响[J].中国病理生理杂志,2009,25(4):670-675.
作者姓名:张美红  周克元
作者单位:1广东医学院生物化学与分子生物学研究所, 广东 湛江 524023; 2广东医学院衰老研究所, 广东 东莞 523808
基金项目:广东省重点学科资助项目,广东省科技计划项目,广东医学院青年基金 
摘    要:目的: 研究RNA干扰(RNAi)效应对人卵巢癌细胞株HO8910PM和HO8910中bi-1基因表达的抑制作用和凋亡诱导作用。 方法: 把表达bi-1 shRNA的各重组干扰质粒转染到HO8910PM和HO8910细胞中,RT-PCR和Western blotting法检测bi-1基因mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术和Hoechst 33258/PI荧光染色检测siRNA诱导细胞凋亡作用。结果:与对照组细胞相比较,转染4种候选干扰质粒组细胞中bi-1的mRNA和蛋白表达水平均明显下降(P<0.05),以转染pmU6-b4组细胞的表达抑制率最高,在HO8910PM细胞中的抑制率分别为 (45.50±3.04)%和(51.08±4.96)%,在HO8910细胞中的抑制率分别为 (37.29±3.69)%和(44.96±4.28)%;流式细胞术结果表明,与对照组细胞相比较,转染pmU6-b4质粒24 h、48 h、72 h、96 h的HO8910PM细胞中亚二倍体峰比值明显升高 (P<0.05),以转染72 h组细胞的比值最高,达到 (25.89±5.63)%,而HO8910细胞中无亚二倍体峰出现;荧光显微镜下可见转染pmU6-b4质粒72h的HO8910PM细胞出现细胞核缩小、染色质固缩和核断裂,而HO8910细胞核无明显变化。 结论: 针对bi-1的siRNA能特异有效地下调HO8910PM和HO8910细胞中bi-1基因的表达,不同序列特异性的siRNA下调bi-1基因表达的能力不同;瞬时转染质粒pmU6-b4能有效诱导HO8910PM细胞凋亡,但不能诱导HO8910细胞凋亡。

关 键 词:Bax抑制剂-1  RNA干扰  卵巢肿瘤  细胞凋亡  
收稿时间:2008-4-11
修稿时间:2008-9-17

Ovarian serous cystadenocarcinoma cell apoptosis induced by inhibition of Bax inhibitor-1 (bi-1) gene expression with RNA interference
ZHANG Mei-hong,ZHOU Ke-yuan.Ovarian serous cystadenocarcinoma cell apoptosis induced by inhibition of Bax inhibitor-1 (bi-1) gene expression with RNA interference[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2009,25(4):670-675.
Authors:ZHANG Mei-hong  ZHOU Ke-yuan
Institution:1Institute of Biochemistry and Molecular Biology, Guangdong Medical College, Zhanjiang 524023, China; 2Aging Institute, Guangdong Medical College, Dongguan 523808, China. E-mail: mhzhang69@163.com
Abstract:
Keywords:Bax inhibitor-1  RNA interference  Ovarian neoplasms  Apoptosis
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