| 抗人红细胞单链抗体基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 司炳银,祝庆余.抗人红细胞单链抗体基因的克隆与表达[J].军事医学科学院院刊,2001,25(3):180-185. |
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| 作者姓名： | 司炳银 祝庆余 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院微生物学流行病学研究所 |
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| 摘 要： | 目的：获得抗人红细胞单链抗体（single-chain antibody,ScFv)基因，并在大肠杆菌中表达具有能与人红细胞特异性结合的ScFv。方法：以从分泌抗人红细胞单克隆抗体细胞株中提取细胞的总RNA为模板，利用扩增鼠源性抗体可变区基因的通用引物，通用RT－PCR分别获得轻链（VL）、重链（VH）可变区基因，并通过15个氨基酸的加接肽（Gly4Ser)3按VL－接头－VH的顺序连接起来，组建成ScFv基因。结果：核苷酸序列分析证明，获得的单链抗体基因VH基因属于小鼠抗体重链可变区基因家族的V（A）组，VL基因属于小鼠抗体k轻链可变区基因家族的IV组。与PGEX－5X－3表达载体上的GST融合蛋白表达后，在相对分子质量54000有一明显的空载体对照没有的蛋白带（ScFv28000，GST26000）。间接免疫荧光证明该表达产物能与人红细胞特异性结合。结论：获得抗人红细胞ScFv基因和具有抗体活性的抗人红细胞ScFv，为建立患者自身红细胞凝集试验奠定了基础。
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| 关 键 词： | 单链抗体 序列分析 基因表达 抗人红细胞单链抗体 基因克隆 |
| 文章编号： | 1000-5501(2001)03-0180-06 |
| 修稿时间： | 2001年4月16日 |
Cloning and expression of the ScFv gene encoding anti-human red blood cell |
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| SI BingYin,ZHU QingYu.Cloning and expression of the ScFv gene encoding anti-human red blood cell[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2001,25(3):180-185. |
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| Authors: | SI BingYin ZHU QingYu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | single chain antibody sequence analysis gene expr ession |
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