摘 要: | 目的:通过观察不同浓度阿托品联合10-5 mol/L卡巴胆碱干预下D407细胞表达及分泌TGF β2的变化,探讨阿托品对RPE细胞表达及分泌TGF β2的调控作用。方法:常规培养D407细胞,药物干预前换用无血清培养基培养, 分为4组。(1)实验组(A组):A1~A5组依次加入10-4~10-8 mol/L阿托品,孵育30 min后每组加入10-5 mol/L卡巴胆碱;(2)阴性对照组(B组):B1~B5组依次加入10-4~10-8 mol/L阿托品;(3)阳性对照组(C组):加入10-5 mol/L卡巴胆碱;(4)空白对照组(D组):不加药物。干预24 h后采用RT PCR,Western印迹及ELISA法检测细胞胞浆中TGF β2 mRNA及蛋白质的表达水平及上清液中TGF β2的含量。统计学方法采用单因素方差分析。结果:实验组D407细胞胞浆TGF β2 mRNA和蛋白质表达水平及上清中TGF β2蛋白质含量均较阳性对照组低,10-4 mol/L阿托品可完全阻断10-5 mol/L卡巴胆碱上调TGF β2表达及分泌的作用,其效应具有浓度依赖性(F=1 056.897, 1 320.170, 475.657;P<0.001)。阴性对照组D407细胞胞浆TGF β2 mRNA和蛋白质表达水平及上清中TGF β2蛋白质含量与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:阿托品可有效抑制卡巴胆碱促进人RPE细胞表达及分泌TGF β2的功能,提示M受体参与介导此过程。
|