| ELISA法检测血清中抗CNN2抗体的实验条件优化性探讨 |
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| 引用本文： | 宋 伟,刘玲珑,王鹏飞,姚清媚,周素芳.ELISA法检测血清中抗CNN2抗体的实验条件优化性探讨[J].中国临床新医学,2020,13(5):462-466. |
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| 作者姓名： | 宋 伟 刘玲珑 王鹏飞 姚清媚 周素芳 |
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| 作者单位： | 530021 南宁，广西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（编号：81460432） |
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| 摘 要： | 目的 探讨血清抗钙调节蛋白Calponin 2(CNN2)抗体的最适酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)实验条件。方法 将BL21(DE3) p Lys S-pColdⅢ-C基因工程菌重组表达而分离纯化的CNN2包被至酶标板。采集肝细胞癌患者血清和正常人血清,探讨蛋白包被浓度、血清稀释液的选择、封闭方式及条件的选择、HRP标记亲和素稀释度的最适条件。结果 CNN2蛋白浓度为10μg/ml时为最适蛋白包被浓度。0. 5%胎牛血清蛋白(BSA)为最适封闭方式。使用PBST来稀释血清,成本低,效果好。亲和素的最适稀释比为1∶9 000。最适实验条件的重复性良好。ROC曲线分析结果显示,最适实验条件下,该检测方法 ROC曲线下面积(AUC)为0. 978(95%CI:0. 947～1. 000,P=0. 000);截断值为0. 484,其对应的灵敏度为96. 0%,特异度为93. 0%。结论 构建了检测血清抗CNN2抗体的最适ELISA实验条件。
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| 关 键 词： | 肝细胞癌 Calponin 2 酶联免疫吸附测定 |
| 收稿时间： | 2019/12/12 0:00:00 |
Optimization of experimental conditions for detection of serum anti-CNN2 antibody by ELISA method |
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| SONG Wei,LIU Ling-long,WANG Peng-fei,et al..Optimization of experimental conditions for detection of serum anti-CNN2 antibody by ELISA method[J].Chinese Journal of New Clinical Medicine,2020,13(5):462-466. |
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| Authors: | SONG Wei LIU Ling-long WANG Peng-fei |
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| Institution: | Department of Biochemistry and Molecular Biology, School of Basic Medicine, Guangxi Medical University, Nanning 530021, China |
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