| 混合酶液灌注消化揉搓法分离和培养人脐静脉内皮细胞 |
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| 引用本文： | 鲁刚,袁长吉,韩伟,麻海春,赵恒兰. 混合酶液灌注消化揉搓法分离和培养人脐静脉内皮细胞[J]. 吉林大学学报(医学版), 2008, 34(4): 717-720. DOI: 吉林省科技厅基金资助课题（200505225） |
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| 作者姓名： | 鲁刚 袁长吉 韩伟 麻海春 赵恒兰 |
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| 作者单位： | (1.吉林大学第一医院麻醉科， 吉林 长春130021；2.吉林大学第一医院血液肿瘤科， 吉林 长春130021) |
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| 摘 要： | 目的：建立简便、稳定的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分离和培养方法。方法：采用胰蛋白酶/胶原酶(1∶1,V∶V) 混合酶液灌注消化揉搓方法分离获得HUVECs，简化完全培养液的组成成分（不添加血管内皮细胞生长因子、肝素等辅助因子），以含20%的胎牛血清(FBS) M199液进行培养；采用细胞形态学和Ⅷ因子免疫组织化学染色法及荧光DiI-Ac-LDL法进行鉴定。结果：接种培养的血管内皮细胞(VECs)4 h开始铺展贴壁，3～7 d生长最快，8～10 d汇合呈单层“铺路石”样外观，免疫组织化学染色法和荧光法鉴定纯度达95%以上。结论：混合酶液灌注消化揉搓方法获得了足够数目和纯度的VECs ，保持了细胞的同源同代性。
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| 关 键 词： | 血管内皮细胞 灌注揉搓法 细胞培养 |
| 收稿时间： | 2007-12-18 |
Isolation and cultivation of human umbilical vein endothelial cells by using irrigative kneading digestion method |
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| LU Gang,YUAN Chang-ji,HAN Wei,et al. Isolation and cultivation of human umbilical vein endothelial cells by using irrigative kneading digestion method[J]. Journal of Jilin University: Med Ed, 2008, 34(4): 717-720. DOI: 吉林省科技厅基金资助课题（200505225） |
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| Authors: | LU Gang YUAN Chang-ji HAN Wei et al |
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