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| 人结肠癌相关成纤维细胞的原代培养及其生物学特性 | |
| 引用本文： | 乌新林,林凯金,苏秀兰,侯明星,董培德,施琳.人结肠癌相关成纤维细胞的原代培养及其生物学特性[J].中华实验外科杂志,2012,29(11). |
| 作者姓名： | 乌新林 林凯金 苏秀兰 侯明星 董培德 施琳 |
| 作者单位： | 1. 内蒙古医科大学附属医院普通外科, 呼和浩特,010059 2. 内蒙古医科大学 3. 内蒙古医科大学附属医院临床医学研究中心, 呼和浩特,010059 4. 内蒙古医科大学附属医院病理科, 呼和浩特,010059 |
| 基金项目： | 内蒙古自然科学基金面上项目，内蒙古医科大学附属医院重大科研项目 |
| 摘 要： | 目的 探讨人结肠癌相关成纤维细胞(CAFs)及结肠正常成纤维细胞(NFs)的培养和鉴定方法,分析两者在生物学特性和蛋白表达方面的差异.方法 采用组织块法和胶原酶消化法进行人结肠CAFs和NFs的原代培养；选择第3代人结肠CAFs及NFs,通过形态学观察和免疫细胞化学染色进行鉴定；细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测人结肠CAFs和NFs的增殖活性,并绘制7d生长曲线；酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定结肠CAFs和NFs细胞上清液中骨桥蛋白(OPN)、转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶(MMP)-2含量.结果 结肠CAFs胞质突减少,细胞不规则,排列紊乱,可见双核及多核细胞,除细胞角蛋白(CK)外,波形蛋白(vimentin)与α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)均为阳性表达；与结肠NFs比较,结肠CAFs增殖活性明显增强；ELISA法测定结肠CAFs和NFs细胞上清液中蛋白含量,其中OPN分别为(2.106±0.137) μg/L和(1.499±0.151) μg/L(P ＜0.01),TGF-β分别为(331.203±12.203) ng/L和(315.391±12.998) ng/L(P＜0.01),VEGF分别为(17.216±0.632) ng/L和(14.887 ±0.661) ng/L(P＜0.01),MMP-2分别为(1.830±0.192) μg/L和(1.436±0.102) μg/L(P ＜0.01).结论 通过组织块法和胶原酶消化法原代培养皆可获得高纯度的人结肠CAFs和NFs；两者在形态结构、增殖活性和蛋白表达等方面差异有统计学意义,这些差异可能是人结肠CAFs发挥其促结肠癌发生发展作用的生物学基础. |
| 关 键 词： | 结肠癌 癌相关成纤维细胞 原代培养 生物学特性 |
Primary culture of human colon carcinoma-associated fibroblasts and biological characteristics |
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| WU Xin-lin , LIN Kai-jin , SU Xiu-lan , HOU Ming-xing , DONG Pei-de , SHI Lin.Primary culture of human colon carcinoma-associated fibroblasts and biological characteristics[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2012,29(11). | |
| Authors: | WU Xin-lin LIN Kai-jin SU Xiu-lan HOU Ming-xing DONG Pei-de SHI Lin |
| Abstract: | |
| Keywords: | Colon carcinoma Carcinoma-associated fibroblasts Primary culture Biological characteristics |
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