| TGF-β1 shRNA真核表达质粒抑制人肺成纤维细胞TGF-β1的表达 |
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| 作者姓名： | 马莎 吕昭萍 王应莉 |
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| 作者单位： | 1. 云南省第一人民医院风湿免疫科,昆明,650032
2. 昆明医学院第一附属医院,昆明,650032 |
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| 摘 要： | 目的:观察构建成功的三个针对人转化生长因子β1(TGF-β1)的小发夹RNA(shRNA)真核表达质粒抑制人肺成纤维细胞TGF-β1的表达.方法:将真核表达载体psiSTRIKE-RNAi1、psiSTRIKE-RNAi2、psiSTRIKE-RNAi3和对应的阴性对照载体经酶切鉴定和测序分析后,以Lipofectamine2000介导转染人肺成纤维细胞,48小时后应用实时荧光定量PCR检测人肺成纤维细胞TGF-β1 mRNA的表达并用ELISA检测细胞上清液中TGF-β1蛋白质的浓度.结果:重组质粒经酶切和DNA测序证实插入片段的碱基序列与预期设计一致.转染组细胞TGF-β1表达受到明显抑制,以psiSTRIKE-RNAi2的抑制效应最为显著(P＜0.01).结论:三个针对TGF-β1shRNA的重组质粒均能抑制TGF-β1在人肺成纤维细胞中的表达.
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| 关 键 词： | 转化生长因子β1 RNA干扰 肺成纤维细胞 肺纤维化 基因治疗 |
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