| 葛根素对成骨细胞中miRNA-204的调控及其与Runx2基因表达的关系 |
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| 引用本文： | 张莹莹,周建斌,赵凤鸣,詹秀琴＊.葛根素对成骨细胞中miRNA-204的调控及其与Runx2基因表达的关系[J].中国骨质疏松杂志,2016(6):677-682. |
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| 作者姓名： | 张莹莹 周建斌 赵凤鸣 詹秀琴＊ |
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| 作者单位： | 南京中医药大学基础医学院生物教研室，江苏南京 210023 |
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| 基金项目： | 江苏省科技厅项目（BK20131417） |
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| 摘 要： | 目的研究葛根素作用于成骨细胞MC3T3-E1后miRNA表达的变化以及与Runx2基因表达的关系。方法 RT-PCR和western blot法检测Runx2的mRNA表达水平和蛋白表达水平;miRNA表达谱检测葛根素作用于成骨细胞后可能靶向Runx2的miRNA;Target Scan、Pic Tar等靶点预测软件预测靶向Runx2的miRNA;RT-PCR测定miRNA-204表达量;构建Runx23’UTR/突变型Runx2 3’UTR重组质粒、合成miRNA-204mimics和miRNA-204NC共转染MC3T3-E1细胞,双荧光素酶报告基因系统验证靶基因;miRNA-204mimics和miRNA-204inhibitor转染MC3T3-E1细胞,RT-PCR和western blot检测转染前后Runx2的mRNA表达量和蛋白表达量的变化。结果与空白组比较葛根素作用后Runx2的miRNA和蛋白表达均上升;miRNA-204表达水平下降;表达谱和靶点预测软件预测靶向Runx2的miRNA共同有miR-204、miR-3072-3p等;过表达miRNA-204后Runx2的蛋白表达水平下降,干扰miRNA-204表达后Runx2的蛋白水平上升。结论葛根素在成骨细胞中可通过调节靶向Runx2基因的miRNA-204来促进细胞增值分化。
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| 关 键 词： | 成骨细胞 葛根素 Runx2 miRNA-204 靶基因 转染 过表达 干扰 |
The effect of puerarin on the regulation of miRNA-204 and the expression of Runx2 gene in osteoblasts |
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| ZHANG Yingying,ZHOU Jianbin,ZHAO Fengming,ZHAN Xiuqin.The effect of puerarin on the regulation of miRNA-204 and the expression of Runx2 gene in osteoblasts[J].Chinese Journal of Osteoporosis,2016(6):677-682. |
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| Authors: | ZHANG Yingying ZHOU Jianbin ZHAO Fengming ZHAN Xiuqin |
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| Institution: | Biology Teaching and Researching Section, Basic Medical College of Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Osteoblasts Puerarin Runx2 miRNA-204 Target gene Transfection Overexpression Interference |
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