| hsa-miR-655靶向调控绝经后骨质疏松症肾阴虚证关联基因CLCF1的实验研究 |
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| 引用本文： | 陈娟,谢丽华,李生强,许惠娟,陈赛楠,马海珍,葛继荣.hsa-miR-655靶向调控绝经后骨质疏松症肾阴虚证关联基因CLCF1的实验研究[J].中国骨质疏松杂志,2016(8):939-943. |
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| 作者姓名： | 陈娟 谢丽华 李生强 许惠娟 陈赛楠 马海珍 葛继荣 |
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| 作者单位： | 福建省中医药研究院骨质疏松证候基因组学重点研究室,福州350003 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（81403420)；福建省卫生厅青年科研课题(2013-2-73) |
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| 摘 要： | 目的研究靶向调控绝经后骨质疏松症肾阴虚证关联基因CLCF1的microRNAs。方法通过生物信息学预测可能与CLCF1基因3'非编码区(3'Non encoding area,3'UTR)作用的miRNAs;将人工合成的野生型和突变型CLCF1基因3'UTR区序列克隆至荧光素酶报告质粒;将重组荧光素酶报告载体和miRNAs表达载体共转染293T细胞,用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性,验证miRNA对CLCF1基因翻译水平的抑制作用。结果生物信息学预测结果显示,CLCF1基因3'UTR与hsa-miR-655、hsa-miR-300、hsa-miR-381、hsa-miR-374c、hsa-miR-515等5个miRNAs存在互补结合位点;双荧光素酶实验结果表明,与对照组比较,hsa-miR-655组荧光活性下调至33.09%,差异有显著性意义(P=0.001),当使用突变型CLCF1基因3'UTR,荧光活性上调至67.22%,说明hsa-miR-655对CLCF1 3'UTR的基因表达水平有显著抑制作用;与对照组比较,hsa-miR-374c和hsa-miR-515组荧光活性分别下调27.27%(P=0.000)和27.74%(P=0.006),二者对CLCF1 3'UTR的基因表达水平有一定抑制作用;hsa-miR-300和hsa-miR-381组与对照组相比,荧光活性分别下调6.35%(P=0.213)和9.89%(P=0.127),二者对CLCF1 3'UTR的基因表达无明显抑制作用。结论 hsa-miR-655通过靶向结合CLCF1 mRNA的3'UTR区,在转录后水平负性调控绝经后骨质疏松症肾阴虚证关联基因CLCF1的表达。
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| 关 键 词： | 中西医结合 肾阴虚证 绝经后骨质疏松症 CLCH基因 微小RNA 3''非编码区 荧光素酶报告系统 |
Experimental study on the hsa-miR-655 targeted regulation of the CLCF1 gene in postmenopausal osteoporosis associated with Kidney Yin deficiency |
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| CHEN Juan,XIE Lihu,LI Shengqiang,XU Huijuan,CHEN Sainan,MA Haizhen,GE Jirong.Experimental study on the hsa-miR-655 targeted regulation of the CLCF1 gene in postmenopausal osteoporosis associated with Kidney Yin deficiency[J].Chinese Journal of Osteoporosis,2016(8):939-943. |
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| Authors: | CHEN Juan XIE Lihu LI Shengqiang XU Huijuan CHEN Sainan MA Haizhen GE Jirong |
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