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| 人反义VEGF基因表达载体的构建及其对卵巢癌细胞增殖的影响 | |
| 引用本文： | 严瑞兰,金明,钱新华,惠宏襄,辛晓燕,王建,王德堂. 人反义VEGF基因表达载体的构建及其对卵巢癌细胞增殖的影响[J]. 中国癌症杂志, 2001, 11(4): 289-293 |
| 作者姓名： | 严瑞兰 金明 钱新华 惠宏襄 辛晓燕 王建 王德堂 |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院妇产科, 2. 第四军医大学分子生物学教研室, 3. 第一军医大学南方医院儿科, |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助(39700147). |
| 摘 要： | 目的：构建人反义VEGF基因真核表达载体，进行抗血管生成治疗卵巢癌实验。方法：RT－PCR法获得人VEGF基因，将VEGF基因反向克隆入真核表达载体pcDNA3中，酶切鉴定结果。用此真核表达载体转染人卵巢癌细胞HO－8910，G418筛选获得阳性克隆，RNA斑点杂交鉴定HO－8910细胞中VEGF表达。Western blot及间接免疫荧光法检测转染前后HO－8910 细胞中VEGF蛋白表达。检测转染前后瘤细胞的生物学性状及裸鼠体内致瘤性。结果：RT－PCR法得到VEGF基因，并获得反向构建的VEGF真核表达载体。VEGF反义RNA部分阻断了HO－8910细胞中VEGF表达，转染后单个细胞的克隆形成能力明显减弱；细胞周期中，G1期细胞增多，S期细胞减少，细胞增殖能力降低；形态学超微结构显示细胞器扩张和肿胀，核染色质边集，凝集成块，可见明显的凋亡改变。裸鼠体内致瘤性降低。结论：成功构建了反义VEGF基因真核表达载体，该载体可明显抑制卵巢癌细胞增殖，为卵巢癌的基因治疗提供了一定的实验依据。 |
| 关 键 词： | 血管内皮生长因子 真核表达载体 构建 卵巢癌 细胞增殖 VEGF基因 |
| 文章编号： | 1007-3639(2001)04-0289-05 |
| 修稿时间： | 2001-05-21 |
Construction of antisense VEGF eukaryotic expression vector and effect to ovarian cancer cell |
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| YAN Rui-lan,JIN Ming,QIAN Xin-hua,et al. Construction of antisense VEGF eukaryotic expression vector and effect to ovarian cancer cell[J]. China Oncology, 2001, 11(4): 289-293 | |
| Authors: | YAN Rui-lan JIN Ming QIAN Xin-hua et al |
| Abstract: | |
| Keywords: | VEGF eukaryotic expression vector construction ovarian cancer proliferation |
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