| 摘 要： | 近来研究表明，长期的化疗会导致肿瘤细胞多药耐药(multidrug resistance，MDR)的产生，它与多药耐药基因(MDRl)表达产物，P-糖蛋白(P-glycoprotein，PgP，170 kD)，的过度表达有关。淋巴因子激活的杀伤(Lymphokine activated killer，LAK)细胞对新鲜或无耐药细胞研究较多，其明显的杀伤作用已获肯定。已有人进行过LAK细胞对白血病耐药细胞株的体外杀伤研究[1]，也有人进行过流式细胞术(flow cytometry，FCM)检测MDR的研究[2]。但是，应用FCM检测异体LAK细胞对白血病耐药细胞的体外净化作用国内外仍无人报道，现报道如下。1 材料与方法1．1 主要试剂、细胞、标本及仪器 RPMI 1640细胞培养液、淋巴细胞分离液(Fi-coll)、白细胞介素-2(IL-2)、MDR-PE(P170单抗)、IgG2a-PE(P170单抗阴性对照)。正常人单采白细胞。白血病骨髓标本：取自复发的或长期化疗的白血病患者骨髓6例，4男2女，19岁～56岁之间，经血细胞形态学确诊。主要仪器：流式细胞仪。1．2 LAK细胞的制备 取正常人单采白细胞20 ml，以无菌生理盐水等体积混合稀释，分数管按2：1(体积比)缓慢加入含有Ficoll的离心管中，2 000 r／min离心25 min后吸取界面层细胞(即单个核细胞)，用生理盐水离心清洗3次，调整细胞浓度为l×106，加入1 500 U／ml浓度的IL-2，置于37℃，5％CO2培养箱中孵育4 d即成。1．3 白血病原代细胞悬液的制备 无菌抽取复发的或长期化疗的白血病患者骨髓3ml，肝素抗凝(20／ml)，以无菌生理盐水等体积混合稀释，将此骨髓稀释液缓慢加入含有3ml Ficoll的离心管中，2 000 r／min离心20 min后吸取界面层细胞，用生理盐水离心清洗3次，调整细胞浓度为1×105，置于37℃，5％CO2培养箱中培养备用。
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