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Pax5基因在野生型斑马鱼全胚胎发育早期的表达
引用本文:姚冬静,舒莉萍,何志旭,马建娟,李涛,黄惠敏. Pax5基因在野生型斑马鱼全胚胎发育早期的表达[J]. 第二军医大学学报, 2012, 33(1): 21-26
作者姓名:姚冬静  舒莉萍  何志旭  马建娟  李涛  黄惠敏
作者单位:1. 贵阳医学院儿科教研室,贵阳,550004
2. 贵阳医学院组织工程与干细胞实验中心,贵阳550004;贵阳医学院免疫学教研室,贵阳550004
3. 贵阳医学院儿科教研室,贵阳550004;贵阳医学院组织工程与干细胞实验中心,贵阳550004
基金项目:国家自然科学基金面上项目(30960412),贵州省科技基础条件平台项目([2009]4005),贵州省优秀科技教育人才省长专项资金(S2008-4)。
摘    要:[摘要]:目的 构建斑马鱼pCS2+-pax5重组质粒,经体外转录合成斑马鱼pax5基因的反义mRNA探针。方法 提取斑马鱼胚胎总RNA后经RT-PCR克隆斑马鱼pax5基因片段,将得到的pax5基因片段和pCS2+质粒经EcoRⅠ、XbaⅠ双酶切后插入pCS2+质粒中,通过对重组质粒进行双酶切、菌落PCR以及插入片段序列测定鉴定后,经T3 RNA体外转录体系合成地高辛标记的pax5基因的反义mRNA探针。结果 采用RT-PCR和pCS2+载体等相关技术获得了斑马鱼pax5基因克隆,经酶切、菌落PCR以及测序鉴定证明得到了pCS2+-pax5重组质粒以及pax5基因的反义mRNA探针,经过斑马鱼全胚胎原位杂交技术检测了斑马鱼pax5基因在野生型斑马鱼发育过程中的表达情况。结论 成功构建了pCS2+-pax5重组质粒、制备了pax5基因的反义mRNA探针以及完成了野生型斑马鱼不同时相的全胚胎原位杂交。

关 键 词:斑马鱼;pCS2+;pax5基因;反义mRNA;原位杂交
收稿时间:2011-08-26
修稿时间:2011-12-16

Expression of pax5 gene in wildtype zebrafish embryos
YAO Dong-jing,SHU Li-ping,HE Zhi-xu,MA Jian-juan,LI Tao and HUANG Hui-min. Expression of pax5 gene in wildtype zebrafish embryos[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2012, 33(1): 21-26
Authors:YAO Dong-jing  SHU Li-ping  HE Zhi-xu  MA Jian-juan  LI Tao  HUANG Hui-min
Affiliation:1. Department of Pediatrics, Guiyang Medical University, Guiyang 550004, Guizhou, China2. Tissue Engineering and Stem Cell Research Center, Guiyang Medical University, Guiyang 550004, Guizhou, China3. Department of Immunology, Guiyang Medical University, Guiyang 550004, Guizhou, China
Abstract:
Keywords:zebrafish  pCS2+ vector  pax5 gene  antisense mRNA  in situ hybridization
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