| 抗重组志贺样毒素ⅡA亚单位单链抗体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 毛旭虎,马颖,陈洪章,邹全明. 抗重组志贺样毒素ⅡA亚单位单链抗体的构建及表达[J]. 免疫学杂志, 2006, 22(4): 374-376,380 |
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| 作者姓名： | 毛旭虎 马颖 陈洪章 邹全明 |
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| 作者单位： | 第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室,重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,400038;第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室,重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,400038;第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室,重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,400038;第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室,重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,400038 |
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| 摘 要： | 目的 构建重组志贺样毒素ⅡA亚单位（SLT2A）单链抗体基因（scFv），并在大肠杆菌中进行分泌表达。方法 通过连接肽（Gly4Ser），将已成功扩增的抗SLT2A单克隆抗体（mAb）5F3的VL和Va连接成scFv基因VH-Linker-VL并在Va基因5′端和VL基因3′端引入Sfi Ⅰ和Not Ⅰ的酶切位点，克隆至经改造的分泌性表达载体pCANTAB6His中，转化Ecoli HB2151，IPTG诱导表达。表达产物经亲和层析纯化后，SDS-PAGE和Westem blot分析鉴定。结果 经限制性酶切鉴定及DNA测序分析证实，基因构建正确。SDS-PAGE和Westem blot分析表明scFv基因在大肠杆菌中得到表达，表达产物的相对分子质量为27000，与理论预期值相符，且可与相应抗原特异结合。结论 成功地实现了抗SLT2A scFv基因的原核分泌表达，为探讨0157菌感染的机制及防治研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 志贺样毒素 单链抗体 分泌表达 |
| 文章编号： | 1000-8861（2006）04-0374-04 |
| 收稿时间： | 2006-01-16 |
| 修稿时间： | 2006-01-162006-06-12 |
Construction and expression of anti-SLT 2A scFv gene in E. coli |
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| MAO Xu-hu,MA Ying,CHEN Hong-zhang,ZOU Quan-ming. Construction and expression of anti-SLT 2A scFv gene in E. coli[J]. Immunological Journal, 2006, 22(4): 374-376,380 |
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| Authors: | MAO Xu-hu MA Ying CHEN Hong-zhang ZOU Quan-ming |
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| Affiliation: | Department of Clinical Microbiology and Clinical Immunology, College of Medical Laboratory, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Shiga like toxin scFv Secretary expression |
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