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人原发型肝癌组织cDNA文库的构建
引用本文:刘辉,李钧,张阳德,周伟平,李爱军,潘泽亚,傅思源,陆炯炯,邱应和,吴东,吴孟超.人原发型肝癌组织cDNA文库的构建[J].中国现代医学杂志,2007,17(21):2621-2624.
作者姓名:刘辉  李钧  张阳德  周伟平  李爱军  潘泽亚  傅思源  陆炯炯  邱应和  吴东  吴孟超
摘    要:目的 快速构建混合人原发型肝癌组织cDNA文库.方法 从混合人原发型肝癌组织分离总RNA,以含有sfiIB酶切位点的oligo(dT)引物合成第1链cDNA,以含sfiIA酶切位点的SMART寡核苷酸为引物经LD-PCR扩增双链cDNA,双链cDNA经sfiI(IA & IB)酶切,以CHROMA SPIN-400柱分级分离cDNA,收集符合需要的cDNA片段并纯化,随后将之与λTriplEx2载体连接经体外包装成噬菌体cDNA文库.结果 经检测共获得3.96×106个重组子,重组率>93%,文库经扩增后滴度为3.92×109 pfu/ml.结论 用SMART方法构建的原发型肝癌组织cDNA文库质量较高,为以后筛选获取原发型肝癌特异抗原基因或其他相关基因奠定了基础.

关 键 词:cDNA文库  原发型肝癌  肿瘤抗原
文章编号:1005-8982(2007)21-2621-04
收稿时间:2007-08-20
修稿时间:2007年8月20日

Construction of directional cDNA library from mixed human 1Hepatocellular Carcinoma tissue
LIU Hui,LI Jun,ZHANG Yan-de,ZHOU Wei-ping,LI Ai-jun,PAN Ze-ya,FU Si-yuan,LU Jiong-jiong,QIU Ying-he,WU Dong,WU Meng-chao.Construction of directional cDNA library from mixed human 1Hepatocellular Carcinoma tissue[J].China Journal of Modern Medicine,2007,17(21):2621-2624.
Authors:LIU Hui  LI Jun  ZHANG Yan-de  ZHOU Wei-ping  LI Ai-jun  PAN Ze-ya  FU Si-yuan  LU Jiong-jiong  QIU Ying-he  WU Dong  WU Meng-chao
Abstract:
Keywords:cDNA library  primary hepatocellular carcinoma  tumor antigen
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