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微小RNA miR-26a的克隆及其慢病毒表达载体的构建
引用本文:鲁娟,王爽,揭荣荣,姚开泰.微小RNA miR-26a的克隆及其慢病毒表达载体的构建[J].热带医学杂志,2008,8(5):426-429.
作者姓名:鲁娟  王爽  揭荣荣  姚开泰
作者单位:1. 南方医科大学肿瘤研究所,广州,510515
2. 南方医科大学病理学教研室,广州,510515
3. 南方医科大学中医药学院,广州,510515
摘    要:目的 克隆微小RNA hsa-miR-26a并构建其慢病毒表达载体.方法 将PCR扩增得到的miR-26a前体序列和pIVTHM载体经双酶切后连接产生pIVTHM-miR-26a慢病毒表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆.用pIVTHM-miR-26a、psPAχ2和pMD2.G 3质粒共转染包装细胞293FT,包装产生慢病毒.以293FT细胞绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达水平测定病毒滴度.结果 经双酶切鉴定和测序证实,成功构建了miR-26a的慢病毒表达载体pIVTHM-miR-26a.倒置荧光显微镜下观察可见包装细胞293FT呈绿色荧光,并测得病毒滴度为5×105TU/ml.成功构建hsa-miR-26a的慢病毒表达载体.为深入研究miR-26a的生物学功能奠定了基础.

关 键 词:hsa-miR-26a  肿瘤  慢病毒
文章编号:1672-3619(2008)05-0426-03
修稿时间:2007年12月29

Cloning of hsa-miR-26a and Construction of Its Lentiviral Expression Vector
LU Juan,WANG Shuang,JIE Rong-rong,YAO Kai-tai.Cloning of hsa-miR-26a and Construction of Its Lentiviral Expression Vector[J].Journal Of Tropical Medicine,2008,8(5):426-429.
Authors:LU Juan  WANG Shuang  JIE Rong-rong  YAO Kai-tai
Abstract:
Keywords:
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