| 日本血吸虫带电多泡体蛋白5的生物学特性研究 |
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| 引用本文： | 张旻,傅志强,林矫矫,洪炀.日本血吸虫带电多泡体蛋白5的生物学特性研究[J].中国人兽共患病杂志,2022,38(9):764-770. |
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| 作者姓名： | 张旻 傅志强 林矫矫 洪炀 |
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| 作者单位： | 1.河南科技大学动物科技学院,洛阳 471023;2.中国农业科学院上海兽医研究所,国家动物血吸虫病参考实验室,上海 200241;3.中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心),国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,上海 200025; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.31702226,No.31872256)和上海市自然科学基金(No.19ZR1468900)联合资助 |
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| 摘 要： | 目的 克隆、表达日本血吸虫(Schistosoma japonicum,S. japonicum)带电多泡体蛋白5(CHMP5),并对其生物学特性进行研究。方法 利用PCR扩增S. japonicum CHMP5基因目的片段,构建重组质粒pET28a(+)-CHMP5,并对该基因进行生物信息学分析。利用荧光定量PCR检测CHMP5在不同时期虫体中的转录水平。对体外表达的重组CHMP5蛋白进行纯化与质谱鉴定,并通过Western blotting检测其反应原性。利用免疫组化实验分析CHMP5在虫体中的分布。以小鼠为动物模型,评估重组CHMP5蛋白抗日本血吸虫病的免疫保护效果。结果 S. japonicum CHMP5的开放阅读框为675 bp,编码224个氨基酸,具有6个B细胞抗原表位;主要定位于S. japonicum虫体的体被上。CHMP5基因在35 d和42 d虫体中的转录水平高于其它检测时期,且42 d 雌虫中的转录水平约是42 d雄虫的3倍。克隆表达的重组CHMP5蛋白其理论分子量约为29 kDa,具有较好的反应原性;用其免疫小鼠24 d,即可使小鼠产生较高水平的IgG抗体,并最终诱导产生18.96%的减虫率和42.98%的肝脏减卵率。结论 成功克隆、表达了S. japonicum体被蛋白CHMP5,其在不同发育时期虫体中均有表达,获得的重组CHMP5蛋白可诱导小鼠产生部分的免疫保护效果,为深入探讨S. japonicum CHMP5的生物学功能提供了基础。
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| 关 键 词： | 日本血吸虫 带电多泡体蛋白5 转录水平 组织定位 免疫保护 |
| 收稿时间： | 2022-03-14 |
Characterization and expression analysis of charged multivesicular body protein 5 from Schistosoma japonicum |
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| ZHANG Min,FU Zhi-qiang,LIN Jiao-jiao,HONG Yang.Characterization and expression analysis of charged multivesicular body protein 5 from Schistosoma japonicum[J].Chinese Journal of Zoonoses,2022,38(9):764-770. |
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| Authors: | ZHANG Min FU Zhi-qiang LIN Jiao-jiao HONG Yang |
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| Institution: | 1. College of Animal Science and Technology, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471023, China;2. National Reference Laboratory for Animal Schistosomiasis, Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China;3. National Institute of Parasitic Diseases, Chinese Center for Disease Control and Prevention (Chinese Center for Tropical Diseases Research), NHC Key Laboratory of Parasite and Vector Biology, Shanghai 200025, China; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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