| 结核分枝杆菌EsxV亚单位疫苗黏膜免疫诱导的免疫应答 |
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| 引用本文： | 白鹭,宁唤唤,康健,梁璇,谢燕玲,彭钰君,张婧瑶,路延之,柏银兰. 结核分枝杆菌EsxV亚单位疫苗黏膜免疫诱导的免疫应答[J]. 中国人兽共患病杂志, 2022, 38(5): 379-386. DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2022.00.051 |
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| 作者姓名： | 白鹭 宁唤唤 康健 梁璇 谢燕玲 彭钰君 张婧瑶 路延之 柏银兰 |
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| 作者单位： | 1.延安大学生命科学学院,延安 716000; 2.空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室,西安 710032; 3.西北大学生命科学学院,西安 710069 |
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| 基金项目： | 国家“十三五”重大传染病专项课题(No.2018ZX10302302002004)、国家自然科学基金面上项目(No.81971560,No.81671638)和陕西省重点研发项目(No.2019ZDLSF02-04)联合资助 |
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| 摘 要： | 目的 研究结核分枝杆菌抗原Rv3619c(EsxV)黏膜免疫小鼠诱导的免疫应答水平。方法 PCR法扩增esxV基因克隆入原核表达载体pET28a(+),获得的重组E.coli诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定蛋白的表达,亲和层析法纯化EsxV蛋白。以EsxV和/或联合环二腺苷酸(c-di-AMP)经鼻黏膜免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠特异性抗体水平及亚类,MTS法检测脾细胞增殖,qRT-PCR检测脾和肺脏细胞因子表达水平,ELISA法检测脾细胞因子分泌水平。结果 成功构建EsxV的原核表达载体pET28a(+)-esxV并诱导表达目的蛋白,亲和层析法获得了纯化的重组EsxV蛋白。EsxV经黏膜免疫可诱导显著的体液免疫应答,但诱导的细胞免疫应答水平不高。EsxV与c-di-AMP经黏膜接种可诱导特异性IgG水平增加,EsxV蛋白特异的脾细胞增殖,脾和肺细胞的IFN-γ转录增加。c-di-AMP显著提高EsxV特异的IFN-γ、IL-2、IL-10和IL-17细胞因子分泌,而不诱导炎症因子TNF-α和IL-6表达。结论 EsxV与c-di-AMP佐剂构建的亚单位疫苗可诱导特异性体液和细胞免疫应答,可进一步用于新型结核病亚单位疫苗的研制。
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| 关 键 词： | 结核分枝杆菌 6kDa早期分泌靶抗原分泌系统蛋白V(EsxV) 亚单位疫苗 黏膜免疫 环二腺苷酸 |
| 收稿时间： | 2022-01-21 |
Immune responses induced by mucosal immunization with Mycobacterium tuberculosis EsxV subunit vaccine |
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| BAI Lu,NING Huan-huan,KANG Jian,LIANG Xuan,XIE Yan-ling,PENG Yu-jun,ZHANG Jing-yao,LU Yan-zhi,BAI Yin-lan. Immune responses induced by mucosal immunization with Mycobacterium tuberculosis EsxV subunit vaccine[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2022, 38(5): 379-386. DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2022.00.051 |
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| Authors: | BAI Lu NING Huan-huan KANG Jian LIANG Xuan XIE Yan-ling PENG Yu-jun ZHANG Jing-yao LU Yan-zhi BAI Yin-lan |
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| Affiliation: | 1. School of Life Sciences,Yan’an University,Yan’an 716000,China;2. Department of Microbiology and Pathogen Biology, Basic Medical School, Air Force Medical University,Xi’an 710032,China;3. College of Life Sciences,Northwest University,Xi’an 710069, China; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium tuberculosis 6 kDa early secretory antigenic target secretion system protein V (EsxV) subunit vaccine mucosal immune cyclic dimeric adenosine monophosphate(c-di-AMP) |
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