| 马达里亚加病毒TaqMan RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 殷启凯,刘文婧,王国玮,张维嘉,付士红,韩坤,许崇晓,许松涛,李樊,刘亚宁,何英,王振海,聂凯,王环宇. 马达里亚加病毒TaqMan RT-PCR检测方法的建立[J]. 中国人兽共患病杂志, 2022, 38(5): 428-432. DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2022.00.057 |
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| 作者姓名： | 殷启凯 刘文婧 王国玮 张维嘉 付士红 韩坤 许崇晓 许松涛 李樊 刘亚宁 何英 王振海 聂凯 王环宇 |
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| 作者单位： | 1.中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京 102206; 2.传染病预防控制国家重点实验室,卫生健康委生物安全重点实验室,北京 102206; 3.宁夏医科大学,银川 750004; 4.宁夏回族自治区疾病预防控制中心,银川 750004; 5.宁夏医科大学总医院神经病学中心,宁夏神经系统疾病诊疗工程技术研究中心,银川 750004 |
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| 基金项目： | 宁夏回族自治区重点研发计划(No. 2019BCG01003)和传染病预防控制国家重点实验室重点项目(No. 2015SKLID505)联合资助; 殷启凯、刘文婧和王国玮为本文共同第一作者 |
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| 摘 要： | 目的 建立马达里亚加病毒(Madariaga virus, MADV)早期且快速的TaqMan反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法。方法 从GenBank中下载MADV基因序列,根据多序列比对结果选择MADV的NSP1基因中的高保守序列片段设计引物与探针,利用体外转录的RNA 标准品建立了MADV的绝对定量分析模型,并进行灵敏度和特异性评价以及重复性验证。结果 该检测方法的灵敏度为1.0×102拷贝/反应,与其它虫媒病毒无交叉反应,重复性检测变异系数均小于1.5%。通过本研究建立的快速检测方法对源自宁夏回族自治区、浙江省和云南省的共计81份不明原因脑炎病例血清标本及161批库蚊标本进行了测定,检测结果均为阴性。结论 成功建立了MADV TaqMan RT-PCR的快速检测方法,可应用于实验室的早期检测。
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| 关 键 词： | 马达里亚加病毒 TaqMan RT-PCR 分子诊断 |
| 收稿时间： | 2021-11-04 |
Establishment of a TaqMan RT-PCR assay for the detection of Madariaga virus |
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| YIN Qi-kai,LIU Wen-jing,WANG Guo-wei,ZHANG Wei-jia,FU Shi-hong,HAN Kun,XU Chong-xiao,XU Song-tao,LI Fan,LIU Ya-ning,HE Ying,WANG Zhen-hai,NIE Kai,WANG Huan-yu. Establishment of a TaqMan RT-PCR assay for the detection of Madariaga virus[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2022, 38(5): 428-432. DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2022.00.057 |
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| Authors: | YIN Qi-kai LIU Wen-jing WANG Guo-wei ZHANG Wei-jia FU Shi-hong HAN Kun XU Chong-xiao XU Song-tao LI Fan LIU Ya-ning HE Ying WANG Zhen-hai NIE Kai WANG Huan-yu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Madariaga virus TaqMan RT-PCR molecular diagnosis |
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