| 人ERRα基因小分子干扰RNA慢病毒载体构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 孙蓬明,毛晓丹,林芬,蔡良知,吴齐斌,宋一一.人ERRα基因小分子干扰RNA慢病毒载体构建及鉴定[J].福建医药杂志,2011,33(4):1-4. |
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| 作者姓名： | 孙蓬明 毛晓丹 林芬 蔡良知 吴齐斌 宋一一 |
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| 作者单位： | 孙蓬明 (福建省妇幼保健院妇科肿瘤研究室,福州,350001) ； 毛晓丹 (福建省妇幼保健院妇科肿瘤研究室,福州,350001) ； 林芬 (福建省妇幼保健院妇科肿瘤研究室,福州,350001) ； 蔡良知 (福建省妇幼保健院妇科肿瘤研究室,福州,350001) ； 吴齐斌 (福建省妇幼保健院妇科肿瘤研究室,福州,350001) ； 宋一一 (福建省妇幼保健院妇科肿瘤研究室,福州,350001) ； |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目,人事部2007年度留学人员科技活动择优资助项目,福建省科技计划重点项目 |
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| 摘 要： | 目的构建并鉴定靶向人ERRα基因的小分子干扰RNA的慢病毒载体。方法针对ERRαmRNA设计了4条si RNA,并构建pGCSIL-GFP-siERRα慢病毒质粒,PCR扩增阳性克隆并测序鉴定。用pGCSIL-GFP-siERRα、pHelp-er1.0和pHelper2.0质粒共转染293T细胞包装产生慢病毒,测定病毒滴度。将慢病毒干扰RNA及含有ERRα过表达载体共转染293T细胞,Western-blot检测ERRα表达,观察蛋白表达抑制效果。结果 PCR和测序结果与设计的干扰序列一致,病毒滴度达2×109TU/ml。转染细胞中ERRα蛋白表达显著降低。结论成功构建高表达、高效率的人ERRα基因小分子干扰RNA慢病毒载体,为进一步研究ERRα在细胞核内转导中的作用机制和靶向ERRα治疗奠定基础。
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| 关 键 词： | 雌激素受体相关受体α RNA干扰 重组载体 子宫内膜癌 |
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