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9型重组腺相关病毒转染体外培养大鼠心肌细胞的影响
引用本文:高霞,马依彤,杨毅宁,向阳,陈邦党,刘芬,杜雷. 9型重组腺相关病毒转染体外培养大鼠心肌细胞的影响[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2010, 26(1)
作者姓名:高霞  马依彤  杨毅宁  向阳  陈邦党  刘芬  杜雷
作者单位:新疆医科大学第一附属医院心脏中心,新疆,乌鲁木齐,830054
基金项目:国家自然科学基金资助项目,新疆自治区卫生厅青年科技人才专项基金 
摘    要:目的:研究含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的9型重组腺相关病毒(rAAV9)对大鼠心肌H9C2细胞的转染及对细胞生长的影响。方法:rAAV9-EGFP按转染复数(MOI)1×105、1×106、1×107转染H9C2细胞,转染后在倒置荧光显微镜下观察H9C2细胞中EGFP阳性表达情况,采用流式细胞仪检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞的转染效率。观察转染后细胞生长形态,并用AlamarBlue法检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞增殖影响。结果:转染后第1天,MOI=1×106、1×107组中EGFP开始表达;第2天,MOI=1×105组开始表达,各组EGFP表达强度随MOI值的增高而增强,同时EGFP的表达强度随着时间延长而逐渐增强;转染后第4天达到高峰,此时流式细胞术检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞的转染率分别为MOI=1×105组:(14.1±0.2)%、MOI=1×106组:(35.1±4.8)%、MOI=1×107组:(56.8±0.1)%。rAAV9-EGFP转染H9C2细胞后,细胞生长及形态正常,AlamarBlue法进一步检测表明转染组对H9C2细胞增殖无影响。结论:rAAV9-EGFP能够有效地转染H9C2细胞,且rAAV9-EGFP对H9C2细胞增殖无明显抑制。

关 键 词:9型重组腺相关病毒  增强型绿色荧光蛋白  心肌细胞  转染

Recombinant adeno-associated virus serotype 9 transfection of rats H9C2 cells in vitro
GAO Xia,MA Yi-tong,YANG Yi-ning,XIANG Yang,CHEN Bang-dang,LIU Fen,DU Lei. Recombinant adeno-associated virus serotype 9 transfection of rats H9C2 cells in vitro[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2010, 26(1)
Authors:GAO Xia  MA Yi-tong  YANG Yi-ning  XIANG Yang  CHEN Bang-dang  LIU Fen  DU Lei
Affiliation:GAO Xia,MA Yi-tong,YANG Yi-ning,XIANG Yang,CHEN Bang-dang,LIU Fen,DU Lei Department of Cardiology,The First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi 830054,China
Abstract:
Keywords:recombinant adeno-associated virus serotype 9  enhanced green fluorescent protein  H9C2 cells  transfection
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