| 人端粒酶逆转录酶与热休克蛋白70融合表达载体的构建及原核表达 |
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| 引用本文： | 唐鹿群,张 蕾,郭人花,刘 丰,苏 川,束永前.人端粒酶逆转录酶与热休克蛋白70融合表达载体的构建及原核表达[J].南京医科大学学报,2007,27(8):825-828. |
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| 作者姓名： | 唐鹿群 张 蕾 郭人花 刘 丰 苏 川 束永前 |
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| 作者单位： | [1]南京医科大学第一附属医院肿瘤科,江苏南京210029 [2]南京医科大学江苏省现代病原生物学重点实验室,江苏南京210029 |
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| 摘 要： | 目的:构建热休克蛋白70(HSP70)与人端粒酶逆转录酶融合表达载体,在大肠杆菌进行表达.方法:利用PCR方法扩增hTERT基因片段(532aa～637aa),双酶切后插入原核表达载体pET32a的Nco Ⅰ和EcoR Ⅰ位点之间,形成pET32a-hTERT质粒.通过PCR方法扩增人HSP70全长cDNA.双酶切后插入pET32a-hTERT的EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ位点之间,构建hTERT与HSP70的N端融合基因原核表达质粒pET32a-hTERT-HSP70.含有该质粒的大肠杆菌BL21经异丙醛-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.结果:成功的扩增了HSP70基因与hTERT基因片段;测序结果表明成功的构建了pET32a-hTERT-HSP70原核表达载体.含有该质粒的大肠杆菌BL21经诱导后表达约110 kD的蛋白.结论:HSP70与人端粒酶逆转录酶融合表达质粒构建成功,并成功获得了融合蛋白hTERT-HSP70.
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| 关 键 词： | 热休克蛋白70 人端粒酶逆转录酶 融合基因 原核表达 人端粒酶逆转录酶 热休克蛋白 融合蛋白 表达载体的构建 原核表达质粒 genes hTERT encoding recombinant vector identification 质粒构建 融合表达 测序 融合基因 结果 诱导表达 IPTG 半乳糖苷 硫代 丙醛 |
| 文章编号： | 1007-4368（2007）08-0825-04 |
| 收稿时间： | 2006/12/9 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2006-12-09 |
Construction and identification of recombinant vector encoding hTERT and HSP70 genes |
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| TANG Lu-qun,ZHANG Lei,GUO Ren-hu,LIU Feng,SU Chuan and SHU Yong-qian.Construction and identification of recombinant vector encoding hTERT and HSP70 genes[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2007,27(8):825-828. |
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| Authors: | TANG Lu-qun ZHANG Lei GUO Ren-hu LIU Feng SU Chuan and SHU Yong-qian |
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| Institution: | Department of Oncology,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029;Department of Pathogen & Immunology, Jiangsu Province Key Laboratory of Pathogenic Biology, NJMU, Nanjing 210029, China;Department of Oncology,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029;Department of Pathogen & Immunology, Jiangsu Province Key Laboratory of Pathogenic Biology, NJMU, Nanjing 210029, China;Department of Pathogen & Immunology, Jiangsu Province Key Laboratory of Pathogenic Biology, NJMU, Nanjing 210029, China;Department of Oncology,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029 |
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