| DDX41蛋白通过活化IRF3抑制乙型肝炎病毒的复制 |
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| 引用本文： | 吴林峰,杨爱清,郑晓飞,周钢桥.DDX41蛋白通过活化IRF3抑制乙型肝炎病毒的复制[J].军事医学,2021,45(8):578-584. |
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| 作者姓名： | 吴林峰 杨爱清 郑晓飞 周钢桥 |
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| 作者单位： | 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所,蛋白质组学国家重点实验室,国家蛋白质科学中心(北京),北京100850 |
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| 摘 要： | 目的 探讨含DEAD框解旋酶41 (DDX41)基因对乙型肝炎病毒(HBV)复制能力的影响及其作用机制.方法 通过慢病毒包装将稳定过表达DDX41或特异敲低DDX41的短发卡RNA (shRNA)重组质粒转染至HepG2.2.15细胞系,筛选和建立稳定过表达或敲低DDX41的细胞株;通过CRISPR-Cas9技术构建敲除DDX41的HepG2.2.15细胞株;蛋白免疫印迹法检测DDX41蛋白表达水平以及通路验证;酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)表达水平;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测HBV复制相关DNA、RNA以及干扰素mRNA表达水平;Noahern印迹法检测HBV总RNA.结果 过表达DDX41可显著抑制HepG2.2.15细胞系中HBV的复制;而敲低或敲除DDX41可显著促进HepG2.2.15细胞系中HBV的复制.过表达DDX41可显著促进干扰素调节因子3(IRF3)的磷酸化和干扰素β(IFN-β)的表达;而敲低或敲除DDX41可显著抑制IRF3的磷酸化和IFN-β的表达.结论 在肝癌细胞系HepG2.2.15中,DDX41蛋白通过促进IRF3的磷酸化并诱导干扰素β的表达,进而发挥抑制HBV复制的功能.
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| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 DDX41 天然免疫 病毒复制 DNA感受器 |
DDX41 reduces hepatitis B virus replication by activating IRF3 pathway |
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| Authors: | WU Lin-feng YANG Ai-qing ZHENG Xiao-fei ZHOU Gang-qiao |
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