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| 腺病毒介导VEGF基因在人骨髓基质干细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 陈滨,宋艳斌,李玉华,裴国献. 腺病毒介导VEGF基因在人骨髓基质干细胞中的表达[J]. 中国矫形外科杂志, 2008, 16(20): 1573-1575 |
| 作者姓名： | 陈滨 宋艳斌 李玉华 裴国献 |
| 作者单位： | 1. 南方医科大学南方医院创伤骨科,广州,510515 2. 南方医科大学基因工程研究所,广州,510515 3. 南方医科大学珠江医院血液科,广州,510515 |
| 摘 要： | [目的] 体外培养人骨髓基质干细胞(hBMSc),将VEGF165基因腺病毒载体共转染hBMSc,观察其表达.[方法] 共转染实验分为3组:VEGF165和eGFP转染组、空腺病毒载体转染组和未转染组.取重组腺病毒Ad-VEGF165(MOI=20 pfu/cell)感染hBMSe.荧光显微镜下观察eGFP的表达,判断感染效率及细胞生长情况,RT-PCR检测,ELISA和Westernblot检测分别用于观察基因转染的表达.[结果] MOI=20 pfu的转染率已达80%以上,取此值为转染滴度.提取出的总RNA质量较好.以双链cDNA为模板扩增VEGF165基因,产物经1%琼脂糖凝胶电泳,均可见到549 bp(GAPDH)2条带.转染组可见VEGF165表达,空载体组和空白对照组未检测到VEGF165表达.ELISA结果显示基因转染组与转染空载体组和未转染组结果差异呈显著性(P<0.05).Western blot显示:转染组在50 KD处出现特征性条带,而空载体组和空白对照组未见条带.[结论] 外源性VEGF基因在人骨髓基质干细胞(hBMSc)内获得稳定表达,在本实验条件下培养的hBMSc具有典型成骨细胞的形态学特征和较强的生物学活性,向成骨细胞方向分化效率较高,细胞数量可以满足骨组织工程研究的要求. |
| 关 键 词： | 骨髓基质干细胞 绿色荧光蛋白 基因转染 |
Expression of VEGF gene mediated by adenovirus in human bone marrow stromal cell |
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| Abstract: | |
| Keywords: | VEGF |
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