靶向沉默RNF2基因对食管癌细胞放射敏感度的影响

目的 探讨RNF2基因表达对X射线照射后食管癌细胞放射敏感度的影响。方法 针对RNF2mRNA序列，设计合成3对有效的干扰序列（siRNA1、siRNA2和siRNA3）和阴性对照序列。瞬时转染细胞，分别命名为RNF2 siRNA1组、RNF2 siRNA2组、RNF2 siRNA3组，转染空载体组和未转染组分别命名为NC组和control组。RT-PCR和Western blot法观察食管癌ECA109细胞各组中RNF2表达变化。MTT法检测RNF2基因对ECA109增殖能力的影响。克隆形成实验检测RNF2对ECA109放射敏感度的影响。流式细胞术测定RNF2基因干扰后对细胞周期和凋亡分布的影响。结果 3对干扰序列组的RNF2基因在mRNA和蛋白表达水平低于control组和NC组，尤以siRNA1组效果最明显。选择siRNA1作为干扰组进行MTT和流式细胞术检测。MTT结果表明照射后干扰组细胞增殖明显受抑；克隆形成实验的结果显示干扰组的的D0、Dq、SF2显著低于control组和NC组，而干扰组的外推数N（extrapolation number N）值明显高于后者，可见干扰组细胞的放射敏感度高于control组和NC组；流式细胞术显示照射后RNF2 siRNA组G0/G1期明显高于control组和NC组，S期显著低于control组和NC组。结论 siRNA干扰技术有效地抑制了食管癌ECA109细胞中RNF2基因的表达，联合X线照射后显著抑制了细胞增殖，消除了细胞周期阻滞在S期，增加了食管癌的放射敏感度。

Effect of Gene Silencing of RNF2 on Radiosensitivity of Esophageal Carcinoma Cells