鼠IFN-λ2 CHO细胞系建立及生物学活性的研究 |
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作者姓名: | 严玉兰 袁利学 刘洋 曹文雁 步雪峰 步志高 郑金旭 |
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作者单位: | 1. 212002,镇江,江苏大学附属人民医院呼吸科;212013,镇江,江苏大学基础医学与医学技术学院 2. 江苏大学附属人民医院呼吸科,镇江,212002 3. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 4. 江苏大学基础医学与医学技术学院,镇江,212013 |
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摘 要: | 目的 稳定表达鼠IFN-λ2并对其生物学活性进行研究.方法 用水疱口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)刺激小鼠脾脏细胞,克隆mIFN-λ2全长基因,构建真核表达载体PCAGG-EGFP-mIFN-λ2,并在CHO细胞稳定表达,且在小鼠黑色素瘤B16细胞上进行抗病毒活性测定;构建MDBK-Mxp-Luc细胞系诱导Mx1抗病毒蛋白产生.结果 pMD18-T-mIFN-λ2双酶切鉴定,出现582 bp大小的条带,成功构建了PCAGG-EGFP-mIFN-λ2真核表达载体;稳定表达mIFN-λ2 CHO的细胞株分泌的上清中mIFN-λ2蛋白在B16细胞上的抗病毒活性为10~4 AU/ml;mIFN-λ2蛋白诱导鼠Mx1抗病毒蛋白的表达,9~12 h达高峰,24 h后消失(P<0.05).结论 建立了稳定表达mIFN-λ2的CHO细胞株,其分泌型mIFN-λ2蛋白具有明显的抗病毒活性,且与诱导Mx1抗病毒蛋白密切相关.
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关 键 词: | mIFN-λ2 基因克隆 稳定表达 抗病毒活性 Mx1蛋白 |
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