| MHC基因反义RNA导入造血干/祖细胞的研究 |
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| 引用本文： | 邓宇斌,李树浓,梁天文,王斌.MHC基因反义RNA导入造血干/祖细胞的研究[J].中国免疫学杂志,1999,15(1):23-26. |
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| 作者姓名： | 邓宇斌 李树浓 梁天文 王斌 |
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| 作者单位： | 1. 中山医科大学免疫学教研室,广州,510089
2. 中山医科大学免疫学教研室,广州,510089 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,广东省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的：将ＨＬＡＤＲＢ１基因ｃＤＮＡ片段反向插入逆转录病毒质粒ＺＩＰｎｅｏＳＶ（×）ＢａｍＨＩ位点中，构建了ＨＬＡＤＲＢ１基因的逆转录病毒反义ＲＮＡ重组表达载体，用脂质体法导入ＰＡ３１７细胞。方法：用免疫磁珠法分离，富集ＣＤ３４＋脐血造血干／祖细胞。含编码人ＨＬＡＤＲＢ１基因的ｐｃＤＶ１质粒，用ＢａｍＨＩ酶解，回收ＨＬＡＤＲＢ１ｃＤＮＡ片段，将ｃＤＮＡ片段反向插入ｐＺＩＰｎｅｏＳＶ（×）逆转录病毒载体，经扩增、抽提、酶切鉴定，用脂质体将反义ＲＮＡ重组体导入到ＰＡ３１７细胞，用含Ｇ４１８３００μｇ／ｍｌ培养液筛选，获抗性克隆，流式细胞仪检测ＨＬＡＤＲ抗原阳性细胞数。结果：重组质粒转染ＰＡ３１７细胞后，其病毒滴度达１×１０５ＣＦＵ／ｍｌ，脐血造血干／祖细胞经免疫磁珠富集后，ＣＤ３４＋细胞高达８５．０％～９０．０％，导入反义ＲＮＡ的脐血干细胞，其ＨＬＡＤＲ抗原表达从导入前的４５．０％降至２８．０％，抑制率达３８２％，而导入空载体后从５６．０％降至４５．０％，差异不显著。结论：ＨＬＡＤＲ的反义ＲＮＡ能导入脐血干细胞，降低ＨＬＡＤＲ抗原的表达
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| 关 键 词： | 造血干 祖细胞 MHC－Ⅱ类基因 移植免疫应答 |
Antisense RNA of MHC gene were transducted into CD34+ cord blood stem/progenitor cells |
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| DENG Yu Bin,LI Shu Nong,LIANG Tian Wen et al.Sun Yat Sen University of Medical Sciences,Guangzhou.Antisense RNA of MHC gene were transducted into CD34+ cord blood stem/progenitor cells[J].Chinese Journal of Immunology,1999,15(1):23-26. |
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| Authors: | DENG Yu Bin LI Shu Nong LIANG Tian Wen Sun Yat Sen University of Medical Sciences Guangzhou |
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| Institution: | DENG Yu Bin,LI Shu Nong,LIANG Tian Wen et al.Sun Yat Sen University of Medical Sciences,Guangzhou 510089 |
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