| CCR5,CXCR4双靶区反义RNA重组腺病毒载体的构建 |
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| 引用本文： | 李文刚,邵沂,陈红,王艳斌,于敏,徐小元. CCR5,CXCR4双靶区反义RNA重组腺病毒载体的构建[J]. 医学争鸣, 2004, 25(7): 631-634 |
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| 作者姓名： | 李文刚 邵沂 陈红 王艳斌 于敏 徐小元 |
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| 作者单位： | 兰州医学院第一医院传染科,甘肃,兰州,730000;北京大学第一医院感染疾病科,北京,100034;兰州医学院第一医院传染科,甘肃,兰州,730000;北京地坛医院,北京,100038;北京大学第一医院感染疾病科,北京,100034 |
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| 摘 要： | 目的:构建趋化因子受体CCR5,CXCR4双靶区反义RNA重组载体并获取重组腺病毒以用于抗HIV-1基因治疗的研究.方法:用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞中分别扩增出趋化因子受体CCR5,CXCR45′端翻译起始区653bp和636bp的cDNA片段,将其反向插入腺病毒穿梭载体质粒pAdTrack-CMV中,再与包装质粒pAdEasy-1共转染BJ5183细菌同源重组,卡那抗性培养基筛选阳性克隆;同源重组的载体用脂质体转染剂转染293细胞包装、扩增,荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白(GFP)以及PCR法鉴定、氯化铯密度梯度离心法纯化重组腺病毒.结果:成功构建了CCR5,CXCR4双靶区反义RNA重组腺病毒载体,并于293细胞中包装、扩增得到高滴度的重组腺病毒,其滴度为:7.2×1012PFU/mL.结论:CCR5,CXCR4双靶区反义RNA重组腺病毒的构建为研究双靶位辅助受体反义RNA抗HIV-1的作用打下基础.
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| 关 键 词： | 趋化因子受体 腺病毒载体 双靶区反义RNA |
| 文章编号： | 1000-2790(2004)07-0631-04 |
| 修稿时间： | 2003-07-16 |
Construction of recombinant adenoviral vectors carrying antisense RNA to dual-target chemokine receptors CCR5 and CXCR4 |
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| LI Wen Gang ,,SHAO Yi ,CHEN Hong ,WANG Yan Bin ,YU Min ,XU Xiao Yuan. Construction of recombinant adenoviral vectors carrying antisense RNA to dual-target chemokine receptors CCR5 and CXCR4[J]. Negative, 2004, 25(7): 631-634 |
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| Authors: | LI Wen Gang SHAO Yi CHEN Hong WANG Yan Bin YU Min XU Xiao Yuan |
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| Affiliation: | LI Wen Gang 1,2,SHAO Yi 1,CHEN Hong 1,WANG Yan Bin 3,YU Min 2,XU Xiao Yuan 2 1Department of Infectious Disease,First Hospital,Lanzhou Medical College,Lanzhou 730000,China,2Department of Infectious Disease,First Hospital,Peking University,Beijing 100034,China,3Beijing Ditan Hospital,Beijing 100038,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chemokine receptor adenovirus vector dual target antisense RNA |
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