雷帕霉素通过mTORC1/p70S6K通路调控大鼠系膜细胞增殖及细胞周期的机制研究

为了探究雷帕霉素对大鼠系膜细胞增殖、细胞周期的影响及其作用机制,将大鼠系膜细胞(HBZY-1)分为以下6组:对照组(control)、血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor, PDGF) 20 ng·mL-1组、PDGF+雷帕霉素1、10、100和1 000 nmol·L-1组; MTT法和流式细胞术检测雷帕霉素(1、10、100、1 000 nmol·L-1)作用后对细胞增殖和周期的影响; Western blot法检测周期蛋白D1 (cyclin D1)、周期蛋白E (cyclin E)、周期素依赖性蛋白激酶2(cyclin-dependent kinase 2, CDK2)、周期素依赖性蛋白激酶4 (cyclin-dependent kinase 4, CDK4)、p70S6K/p-p70S6K和p27的蛋白表达; Real-time-PCR法检测p27 mRNA。结果显示,雷帕霉素能显著抑制PDGF刺激系膜细胞(glomerular mesangial cells, MCs)引起的增殖,且呈剂量及时间依赖性,但随着浓度增加(1～1 00...