门脉高压患者血浆刺激血管内皮细胞eNOS与Hsp90相互作用的实验研究

目的：用门脉高压患者血浆刺激血管内皮细胞研究内皮型一氧化氮合酶（eNOS）与热休克蛋白90（Hsp90）的相互作用。方法：免疫共沉淀技术是研究蛋白质相互作用的一个有力工具。用肝硬化门脉高压患者血浆处理培养的人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vascular endothelial cell，HUVEC）后，在0、15、30、60和120min时收集细胞，利用该技术检测对Hsp90和eNOS相互作用的影响。细胞裂解液分别用抗eNOS抗体和抗Hsp90抗体沉淀蛋白复合体．经SDS～PAGE电泳和转膜后，再分别用抗Hsp90抗体和抗eNOS抗体进行免疫识别。结果：本实验分别检测出了eNOS和Hsp90的表达,说明Hsp90和eNOS存在相互作用的关系。Hsp90和eNOS对刺激产生的反应有时相性，一般在刺激30min后Hsp90的量有明显增加，进一步说明Hsp90对eNOS调节NO的产生起关键的作用。结论：门脉高压患者血浆可以刺激血管内皮细胞Hsp90与eNOS结合，增强eNOS的生物活性，使NO释放增多。

Plasma from patients with portal hypertension stimulates Hsp90 interacting with the eNOS in vascular endothelial cells