NMDA受体拮抗剂剂量与脑缺血再灌注大鼠海马内源性神经干细胞的增殖

背景：脑缺血再灌注后，过度释放的兴奋性氨基酸可通过NMDA受体激活内源性神经干细胞，促使其增殖、分化，修复神经细胞，但同时也导致细胞内钙离子超载，引起神经细胞的损伤。通过控制NMDA受体活化的程度，刺激内源性神经干细胞激活的同时把损伤减到最小。 目的：观察NMDA受体拮抗剂MK-801质量浓度对脑缺血再灌注大鼠海马内源性神经干细胞增殖的影响。 方法：健康雄性SD大鼠54只随机数字表法分为对照组(不进行任何处理)、手术组(缺血模型制作)及不同剂量MK-801组。采用大鼠四条血管阻断方法(Pulsinelli-4VO法)制备大鼠全脑缺血再灌注模型。不同浓度MK-801组在模型制作前30 min按照0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ，1.2 mg/kg侧脑室注射MK-801。Western-blot、RT-PCR技术检测各组nestin蛋白及mRNA水平及表达。 结果与结论：MK-801剂量在0.8 mg/kg以下时，nestin mRNA及蛋白的表达差异无显著性意义(P > 0.05)，呈现高表达；当剂量为0.8 mg/kg时，可明显抑制内源性神经干细胞增殖；在0.8mg/kg以上，对神经干细胞的抑制作用随着剂量的升高呈递增趋势；在1.2 mg/kg时，大鼠有躁动、共济失调等严重不良反应。nestin mRNA表达结果与蛋白表达趋势相吻合。说明MK-801的剂量与脑梗死后神经功能的修复有一定的关系，实验中0.6 mg/kg是一个比较合适的实验应用剂量，在此剂量下既可使MK-801减少兴奋性氨基酸对神经元的毒性作用，保护神经细胞，又使内源性神经干细胞的增殖不受较大影响。

N-methyl-D-aspartic acid receptor antagonist dose and proliferation of endogenous neural stem cells in the hippocampus of rats with cerebral ischemia/reperfusion