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大鼠Desert Hedgehog基因的克隆和表达
引用本文:刘靖,赵焕英,赵春礼,段德义,高福禄,徐群渊.大鼠Desert Hedgehog基因的克隆和表达[J].解剖学报,2006,37(5):545-548.
作者姓名:刘靖  赵焕英  赵春礼  段德义  高福禄  徐群渊
作者单位:1. 河北医科大学组织学与胚胎学教研室,石家庄,050017
2. 首都医科大学北京神经科学研究所,北京,100069
3. 承德医学院,承德,067000
摘    要:目的克隆大鼠Desert Hedgehog(DHH)基因,构建其真核表达载体并转染TP67细胞;同时制备DHHcRNA正义及反义探针用于检测其在细胞中的表达。方法提取SD大鼠睾丸总RNA,RT-PCR法扩增DHHcDNA片段,连接于pGEM—TEasy载体,经测序后构建真核表达载体pLXSN/DHH并转染PT67细胞;重组质粒经限制性内切酶NotⅠ和NcoⅠ酶切、回收后,进行转录标记反应,原位杂交检测DHH在嘶7细胞中的表达。结果RT-PCR扩增得到1220bp的片段;成功构建了真核表达载体pLXSN/DHH;制备DHH正义及反义探针浓度分别为150mg/L和80mg/L;DHH在PT67细胞中有表达。结论克隆的DHH基因与大鼠Sertoli细胞的DHH基因相同,成功标记了特异、敏感的DHHcRNA探针,转染的DHH基因能够在PT67细胞中表达。

关 键 词:Desert  Hedgehog基因  克隆  表达  逆转录聚合酶链反应  大鼠
收稿时间:2005-01-19
修稿时间:2005-01-192005-05-17

CLONING AND EXPRESSION OF DESERT HEDGEHOG GENE IN THE RAT
LIU Jing,ZHAO Huan-ying,ZHAO Chun-li,DUAN De-yi,GAO Fu-lu,XU Qun-yuan.CLONING AND EXPRESSION OF DESERT HEDGEHOG GENE IN THE RAT[J].Acta Anatomica Sinica,2006,37(5):545-548.
Authors:LIU Jing  ZHAO Huan-ying  ZHAO Chun-li  DUAN De-yi  GAO Fu-lu  XU Qun-yuan
Institution:1. Beijing Institute for Neurosciences, Capital University of Medical Science, Beijing 100069, China ; 2. Department of Histology and Embryology, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, China; 3. Chengde Medical College, Chengde 067000, China
Abstract:
Keywords:Desert Hedgehog gene  Clone  Expression  RT-PCR  Rat
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