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体外培养人鼻中隔软骨细胞合成硫酸糖胺多糖的检测
引用本文:江逊,段小红,狄静芳,史剑波,许庚,崔鹏程. 体外培养人鼻中隔软骨细胞合成硫酸糖胺多糖的检测[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2008, 12(46): 9041-9044
作者姓名:江逊  段小红  狄静芳  史剑波  许庚  崔鹏程
作者单位:1. 解放军第四军医大学唐都医院儿科,陕西省西安市,710038
2. 解放军第四军医大学唐都医院耳鼻咽喉科,陕西省西安市,710038
3. 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室,广东省广州市,510632
4. 中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科,广东省广州市,510080
基金项目:IDO基因转染组织工程化软骨细胞诱导移植免疫耐受的研究,国家自然科学基金,构建"通用化"转基因软骨细胞的研究,广东省自然科学基金,IDO基因转染,免疫负调节组织工程化软骨细胞的研究,广东省科技计划社会发展计划资助,IDO基因转染软骨细胞后移植免疫特性研究,西安市科技计划项目
摘    要:背景:软骨细胞的培养及稳定传代是转基因、构建组织工程化软骨组织及异体移植的前提条件。目的:定量检测体外培养人鼻中隔软骨细胞合成分泌硫酸糖胺多糖的变化情况,评价其对不同代次软骨细胞生物学功能活性。设计、时间及地点:对比观察的细胞学实验,于2004-01/2005—07在暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室完成。材料:人鼻中隔软骨细胞来自鼻中隔偏曲患者手术切除的软骨组织,患者对实验内容知情同意。方法:胶原酶消化分离原代人鼻中隔软骨细胞传代培养至第7代。主要观察指标:阿尔新蓝比色法测定各代细胞外基质的硫酸糖胺多糖含量,光镜观察甲苯胺蓝染色后细胞形态。结果:原代软骨细胞具有最高的硫酸糖胺多糖分泌活性,至第4代则出现了非常明显的下降,第4代以后很低下。甲苯胺蓝染色显示原代细胞对甲苯胺蓝呈明显的蓝色异染反应,第3代异染反应明显减弱,第4代以后异染反应微弱,其结果与硫酸糖胺多糖含量变化相一致。结论:人鼻中隔软骨细胞在体外培养过程中,随传代次数的增加而功能活性逐渐降低,第3代以后的细胞不适于作为人软骨组织工程种子细胞和用于细胞生物学等方面研究。

关 键 词:葡萄糖氨基浆糖类  软骨细胞  细胞外基质  生物材料

Assay of glycosaminoglycans synthesized by cultivated cartilage in the nasal septum in vitro
Jiang Xun,Duan Xiao-hong,Di Jing-fang,Shi Jian-bo,Xu Gen,Cui Peng-cheng. Assay of glycosaminoglycans synthesized by cultivated cartilage in the nasal septum in vitro[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2008, 12(46): 9041-9044
Authors:Jiang Xun  Duan Xiao-hong  Di Jing-fang  Shi Jian-bo  Xu Gen  Cui Peng-cheng
Abstract:
Keywords:
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