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肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体KP-ZS5的分离及鉴定
引用本文:彭秀玲,邵瑞瑞,田艳,黄孝彬,陈绍海,文胜,陈峥宏,崔古贞,齐晓岚,洪伟.肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体KP-ZS5的分离及鉴定[J].贵州医科大学学报,2023(3):259-265.
作者姓名:彭秀玲  邵瑞瑞  田艳  黄孝彬  陈绍海  文胜  陈峥宏  崔古贞  齐晓岚  洪伟
作者单位:1. 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室&贵州省分子生物学重点实验室&贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室;2. 贵州医科大学生物与工程学院;3. 贵州医科大学;4. 贵州建设职业技术学院公共艺术教研室;5. 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室
基金项目:2021年国家级大学生创新创业训练项目(202110660013);;贵州省自然科学基金重点项目([2020]1Z067);
摘    要:目的 肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体KP-ZS5的分离及鉴定。方法 以18株临床分离肺炎克雷伯菌为宿主菌,采用双层平板法从水样中分离肺炎克雷伯菌噬菌体并进行纯化,透射电镜观察噬菌体形态,提取噬菌体DNA及蛋白并测定其生理生化特性。结果 成功分离到1株长尾肺炎克雷伯菌噬菌体,并命名为KP-ZS5,pH稳定性实验表明KP-ZS5不耐强酸(pH≤3);限制性片段酶切多样性(RFLP)分析表明,KP-ZS5基因组中存在3个BglⅡ酶切位点,预计总基因组大小为20 000~30 000 bp;裂解谱实验表明,KP-ZS5可以感染33%(6/18)的临床肺炎克雷伯菌株;SDS-PAGE结果显示,在KP-ZS5外壳蛋白由3种蛋白组成,外壳蛋白分子量为35~48 kDa。结论 成功分离出1株长尾肺炎克雷伯菌噬菌体KP-ZS5,该噬菌体具有较广的宿主范围和pH值耐受性,外壳蛋白组成简单,仅含3种分子量为35~48 KDa的组分,具有在临床治疗肺炎克雷伯菌感染的潜力。

关 键 词:肺炎克雷伯菌  噬菌体  生理生化特征  双层平板法  噬菌体疗法
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